为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对) |
第一步水解 |
产物 (单位bp) |
第二步水解 |
产物 (单位bp) |
A酶切割 |
2100 |
将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 |
1900 200 |
|
1400 |
800 600 |
|||
1000 |
1000 |
|||
500 |
500 |
|||
B酶切割 |
2500 |
将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割 |
1900 600 |
|
1300 |
800 500 |
|||
1200 |
1000 200 |
|||
经A酶和B酶同时切割 |
1900 1000 800 600 500 200 |
(1)该实验设计主要体现了__________________原则。
(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
(3)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
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(4)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和___________序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。
请回答下列有关光合作用的问题。
(1)如下图所示为某植物光合作用速率与光照强度之间的关系。在光照弱的情况下,光合作用速率随________的增加而增加,此时影响光合作用过程的________阶段。由图可见,光照强度超过某一值时,光合作用速率不再增加,此时限制光合作用速率的主要因素是________,光合作用的________阶段受到限制。
(2)叶绿体在光下把ADP和Pi合成ATP的过程称为光合磷酸化。为探究ATP形成的原动力,Jagendorf等科学家在黑暗中进行了如下实验。图中平衡的目的是让类囊体内部的pH和外界溶液相同。实验在黑暗中进行的目的是。
根据实验结果,叶绿体中ATP形成的原动力来自。
酸性磷酸酶(简称ACP)在动、植物和微生物细胞中是调控磷代谢的重要酶类。鲫鱼是我国一种养殖的淡水鱼类,但是鲫鱼生活的水体中常常有金属离子的污染,危害了鲫鱼的生长和繁殖。研究者从鲫鱼内脏中分离纯化得到一种ACP,研究了金属离子对该酶活性的影响。实验操作如下:
(1)取若干洁净的试管,用蒸馏水清洗以去除自来水中的氯离子,其目的是__________,各反应体系均加入等量的pH为4.8的缓冲液,试管中加入不同浓度的Pb2+、Cd2+,Mg2+、Ca2+以及等量的ACP,另取一支试管加入_______________作为对照。
(2)在最适温度下保温一段时间后测定酶的活力,得到如图所示的曲线,从曲线中可以得出的结论是____________________,如果酶的活性降低,可能是酶的________改变所致。
(3)除本题涉及的因素外,影响酶活性的因素还有___________________。
辣椒素,是辣椒的活性成分,它对哺乳动物包括人类都有刺激性并可在口腔中产生灼烧感。辣椒素能够起到降血压和胆固醇的功效,进而在很大程度上预防心脏病。因此,被广泛用于食品保健、医药工业等领域,辣椒素的获得途径如图:
(1)图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的______________和再分化的过程,细胞分化的实质是____________。
(2)图中培养外植体的培养基属于________培养基(物理状态)。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值____________(填“高”或“低”)时,有利于根的分化。对培养基接种前应用________方法灭菌。
(3)用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时,常用的酶是酶和纤维素酶。
(4)提取辣椒素过程中,萃取加热时需安装冷凝回流装置,其目的是。
下图表示分泌蛋白的合成、加工、分泌过程,a、b、c、d表示细胞器,下表是其中三种细胞器的化学成分。请回答相关问题:
细胞器(%) |
蛋白质(%) |
脂质(%) |
核酸(%) |
甲 |
67 |
28 |
微量 |
乙 |
59 |
40 |
0 |
丙 |
39 |
0 |
59 |
(1)图中物质X以方式进入细胞,研究图示生理过程一般采用的方法是。
(2)表中甲、丙分别是、(填图中字母)。
(3)图中可以发生碱基互补配对的结构是(填图中字母),分泌蛋白的合成过程有类RNA参与。
【生物——选修3:现代生物科技专题】。
(1)对于基因工程来说,其核心是;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是。
(2)植物体细胞杂交过程有两个关键,一个是在把植物细胞杂交之前,必须
;另外一个是。
(3)在进行单克隆抗体的生产过程中,要把两种细胞进行融合,一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞,另外一种是;诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、电激、等。
(4)胚胎干细胞在功能上具有发育的性,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生。
(5)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。
①进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
②为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
③采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________;在PCR反应过程中,有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右,其作用是。
利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以_________________增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。