（1）离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊-优题课

为提高某作物的耐盐性，采用农杆菌介导的转基因技术，将耐盐基因R导入受体细胞，经筛选和培养获得若干单拷贝（体细胞中只有1个耐盐基因）转基因耐盐植株，其中3株能在中盐浓度条件下开花结实。若对其中1株（甲）自交后代进行耐盐性检测，结果为耐高盐25株、耐中盐49株、不耐盐26株。
请回答：
（1）农杆菌介导的转基因过程中，目的基因与质粒经相应的切割，再用DNA连接酶连接，形成。通常根据质粒中设计的抗生素，在培养基中添加该种抗生素筛选转化细胞，再进行目的基因等的鉴定。
（2）甲自交后代中耐盐性状的分离比与单基因遗传的性状分离比相同。由此推测转基因植株的耐盐性状是由核基因控制的，耐盐基因已整合到细胞核中的上。该基因的转录产物经加工成为，再转移到中翻译出相应的蛋白质。
（3）请用遗传图解表示甲自交产生后代的过程（用R+表示有耐盐基因，R-表示无耐盐基因）。

下面是烟草叶片原生质体分离和培养的流程图：

请回答：
（1）酶解时，在纤维素酶和果胶酶的混合液中，还需添加来提高混合液的渗透压，以利于获得完整的原生质体。
（2）获得原生质体后，可用方法检测原生质体是否存活。然后将原生质体制成悬浮液，滴加在上，用显微镜观察并计数。要判定原生质体是否已形成细胞壁，可用方法鉴别。
（3）欲通过原生质体培养得到愈伤组织，从培养基的成分考虑，配制培养基时需要注意的主要方面有哪些？

某农场的农业生态工程简图如下：

请回答：
（1）在评价养殖效益时，除了人工投入等成本外，往往采用单位时间内饲料投入量和体重净增长量（可采用相关参数转换成干物质量）作为评价指标，其中体重净增长量为生产量，该值的大小取决于饲料到饲养动物的能量。
（2）该生态工程的核心技术是。若在果园中同时种植蔬菜，属于技术。图中的沼气工程是在沼气池的基础上增添了脱硫塔等设施，更加优化了的新能源开发技术。
（3）在无人为因素干预下，养殖鱼类种群呈“S”形增长，若养鱼场中迁入捕食养殖鱼类幼体的乌鳢鱼，将使“S”形曲线中的下降，通过生态系统的调节，乌鳢鱼和养殖鱼类的数量将趋于相对平衡。

(15分)如图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答:

(1)随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为　。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要　　酶。③是在　　(填“酶的名称”)作用下进行延伸的。
(2)在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanR)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有　　、　　。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是　　。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入。
(3)离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是，该技术的原理是。
(4)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用与提取出的做分子杂交。
(5)科学家将植物细胞培养得到，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。

我国四川省宜宾市的柑橘种植由于受到柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。
（1）有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，新鲜的柑橘皮中含有大量的果蜡、果胶和水分，如直接压榨，出油率较低。为了提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用浸泡，浸泡时间为10h以上，这样压榨时不会。
（2）橘皮精油的提取若采取水蒸气蒸馏法，会出现原料______和有效成分______等问题。
（3）从橘皮中提取的橘皮精油的特点是，具有诱人的橘香味。
（4）某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用花药离体培养技术大量繁殖，则应选择花粉发育至___期的花药培养成功率最高。选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，最常用的方法有_______法，某些植物的花粉不易着色，需采用_____ __法。