在牧草中，白花三叶草有两个稳定遗传的品种，叶片内含氰（HCN）的和不含氰的。现已研究查明，白花三叶草的叶片内的氰化物是经下列生化途径产生的：基因D、H分别决定产氰糖苷酶和氰酸酶的合成，d、h无此功能。
现有两个不产氰的品种杂交，F1全部产氰，F1自交得F2，F2中有产氰的，也有不产氰的。利用F2各表现型叶片的提取液作实验，如果提供含氰糖苷和氰酸酶两种材料，实验时在提取液中分别加入含氰糖苷和氰酸酶，然后观察产氰的情况，结果记录于下表：
| 叶片 |
表现型 |
提取液 |
提取液中加入含氰糖苷 |
提取液中加入氰酸酶 |
| 叶片I |
产氰 |
含氰 |
产氰 |
产氰 |
| 叶片Ⅱ |
不产氰 |
不含氰 |
不产氰 |
产氰 |
| 叶片Ⅲ |
不产氰 |
不含氰 |
产氰 |
不产氰 |
| 叶片Ⅳ |
不产氰 |
不含氰 |
不产氰 |
不产氰 |
（1）氰产生后，储存在牧草叶肉细胞的 （细胞器）中，从代谢的角度考虑，怎样使叶片Ⅳ的提取液产氰? 。
（2）两个不产氰亲本的基因型是 和 ，在F2中产氰和不产氰的理论比为 。
（3）叶片Ⅱ的叶肉细胞中缺乏 酶，叶片Ⅲ可能的基因型是 。
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：
（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度为。
（2）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有种不同DNA片段。
（3）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是
。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。
（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和 DNA连接酶。
（3）基因工程中除质粒外， 和 也可作为运载体。
（4）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，应先用处理大肠杆菌。
（6分)已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
选择性扩增
(1)实验步骤①所代表的反应过程是。
(2)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能______，也不能
___。
(3)为了检测步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用
与进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
(4)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列(相同、不同)。
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
⑴构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶，对进行切割。
⑵培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有，作为标记基因。
⑶香蕉组织细胞具有_____________________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的。
毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（１）在过程②中，用处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是。
（2）在过程③中，用处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_________处理。
（3）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是。在胚胎移植前，通过技术可获得较多胚胎。