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CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA(总DNA)的技术。CTAB能跟核酸形成复合物,在高盐溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在,当降低溶液中盐的浓度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脱掉CTAB;氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下:
① 在50ml离心管中加入20mlCTAB抽提缓冲液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中预热;
②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中,用液氮速冻并研磨成粉末,加入上述离心管中,于65℃水浴中保温30min;
③ 取出离心管中,冷却至室温,加入20mL的氯仿,轻轻混匀20min;
④ 在室温下以 12000r/min的转速离心10-20 min;
⑤ 将上清液移入另一个离心管中,加入2/3体积的经冷却的异丙醇,用玻璃棒轻轻搅动,
小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的复合物沉淀;
⑥ 将沉淀移入另一个离心管中,加入70%乙醇洗涤,重复洗涤1-2次;
⑦ 吹干乙醇后,将DNA溶于适量的TE缓冲液中,在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离并在核酸紫外检测仪上观察。
请回答下列问题:
(1)植物基因组DNA(总DNA)的提取通常采用机械研磨的方法,常温下研磨时,植物细胞匀浆含有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻,材料在研磨时易于破碎,同时还具有________________________________的作用。
(2)实验步骤③ 、④的目的是____________________。
(3)实验步骤⑤中,玻璃棒上出现沉淀的主要原因是________________________________________。
(4)对DNA进行定性检测常用的试剂是_____。琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及__________、__________,使带电分子产生__________而实现分离。DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,利用核酸紫外检测仪可以进行__________。

科目 生物   题型 综合题   难度 中等
知识点: 发酵与食品生产 探究将有油渍、汗渍、血渍的衣物洗净的办法
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中国科学院动物研究所陈大元研究员带领的科研小组,首先选择了兔子卵细胞作为受体卵。他们采用了两种核移植方法,即电融合法和核直接注射法,把大熊猫的体细胞核移入兔的去核卵细胞质中。经过精心的实验,他们已得到了大熊猫的重构胚。实验结果显示,大熊猫的3种体细胞移植到兔去核卵母细胞中均可以卵裂,并进行早期发育,3种供体细胞核移植的融合率在55%~59%之间;融合后的重构卵进行培养后,囊胚率以乳腺细胞最高,而骨骼肌细胞的最低;重构囊胚细胞的染色体数目为42条,与供体(大熊猫)细胞染色体数目相同,与受体动物家兔的染色体数(44条)不同。经DNA指纹分析,也证明了重构囊胚细胞的遗传特性为大熊猫的遗传特性。实验还证明,卵细胞质使体细胞核去分化不具有特异性。大熊猫异种重构胚能否在寄母子宫着床乃至进行全程发育还是道难题,现正在深入实验。
根据以上材料,回答下列问题:
(1)下面叙述除哪项外都是动物克隆技术的益处?_____________。
A.探索异种克隆技术,拯救濒危物种
B.克隆技术与转基因技术结合,使异种器官移植成为可能
C.克隆技术的重要性在于复制出一个动物或一批生物
D.克隆技术的研究将帮助人类认识衰老过程
(2)“去分化”是指____________。
(3)细胞分化为囊胚,囊胚由许多细胞构成,其细胞增殖方式为_____________。
(4)科技预测:请预测大熊猫异种重构胚如果着床成功并顺利产生发育,其表现性状可能是_____________。
A.大熊猫的特点
B.兔子的特点
C.兼有大熊猫与兔子的特点
D.不具生殖能力

1952~1953年,美国科学家斯提瓦用胡萝卜根的悬浮培养细胞进行人工培养,发现单个细胞能像受精卵发育成胚一样的途径,发育成完整植株。1997年英国维尔穆特等人从白面母绵羊体内取出乳腺上皮细胞静息培养,然后把它的核移入黑面母绵羊去核的卵细胞中形成重组细胞,并将重组细胞培养成胚胎,将胚胎植入另一母羊的子宫内后获得了克隆羊多利。
阅读这段材料后,回答下列问题:
(1)文中的悬浮培养细胞和乳腺上皮细胞均为____________。
(2)斯提瓦的实验证明了____________。维尔穆特的实验证明了_____________。从细胞结构和遗传角度分析,两位科学家实验结论的得出,根本原因在于____________。
(3)斯提瓦和维尔穆特实验的差别在于____________。
(4)维尔穆特的实验技术又称为_____________________技术。该技术的经济意义在于:①_____________;②____________。

植物组织培养的培养基中加有激素。下表是培养基中两种植物激素在不同比例时的实验结果。请分析回答:


1
2
3
4
激素种类及
浓度关系
6—BA
6—BA>IBA
6—BA=IBA
6—BA<IBA
结果
组织块产生愈
伤组织
愈伤组织分化
出芽
愈伤组织不断
生长
愈伤组织有长根趋势

(1)6—BA属于_____________类激素,它的作用是________________。
(2)IBA属于_____________类激素,它在本实验中的作用是__________________。
(3)在植物组织培养中,脱分化可用的激素组合是实验_____________和实验_____________中的激素浓度关系,再分化时可用的激素组合是实验_____________和实验_____________中的激素浓度关系。
(4)植物组织培养的培养基中,除激素外,还必须含有_______________________,它的成分至少应该含有_______________________、_______________________等。
(5)判断愈伤组织是否产生,依据是看是否产生了____________的细胞。

图是单克隆抗体制备过程示意图,据图回答:

(1)图中A过程是从小鼠的脾脏中取得_____________细胞,该细胞能够产生_____________。从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。
(2)B过程是一个_____________过程,该过程的进行需要灭活的_____________或_____________的诱导。
(3)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,其特点是_________________。

据图回答:

(1)填写各部分名称:
[1]_____________,[2]_____________,
[3]_____________,[4]_____________。
(2)分泌蛋白在[]_____________上合成,由[]_____________和[]_____________加工,形成[]_____________进行转移。
(3)膜泡转移的方向是_____________→_____________→_____________。
(4)在分泌蛋白的_____________、_____________过程中,需要大量的能量,能量的动力站是_____________,此图说明___________________。

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