可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为代）。
（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除，因为后者产生的会抑制侧芽的生长。
（2） 为筛选出已转化的个体，需将代播种在含的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为
代）。
（3） 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将代播种在含的培养基上，获得所需个体。
（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与植株进行杂交，再自交代后统计性状分离比。
（5）若上述的插入造成了基因功能丧失，
从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。
（6）根据的已知序列，利用技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取植株的，用限制酶处理后，再用将获得的片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中四种单链片断中选取作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。
图表 1环状示意图
A、B、C、D表示能与相应链互补、长度相等的单链片段；箭头指示合成方向。
2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
（1）④过程应用的主要生物技术是。
（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于工程技术范畴。
（3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是。
基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如下图，请据下图分析回答：
（1）图中A是；在基因工程中，需要酶的作用下才能完成剪接过程。
（2）在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是一G↓GATCC一，请在答题纸上的方框内补充画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。
（3）在图中基因工程的操作过程中，可以遵循碱基互补配对原则的步骤有。（用图中序号表示）
（4）从分子水平分析不同种生物之间的基因移植成功的主要原因是，也说明了不同生物共用一套。
（5）研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源是。
请分析下表，回答有关实验的问题。
| 组 别 |
材料 |
实 验 条 件 |
观察内容 |
|
| A |
A1 |
人的口腔上皮细胞 |
健那绿染液等 |
线粒体 |
| A2 |
8%盐酸、吡罗红甲基绿染色剂等 |
DNA和RNA在细胞中的分布 |
||
| B |
豆浆 |
0.1g/mL的NaOH溶液、0.01g/mL的CuSO4溶液 |
蛋白质鉴定 |
|
| C |
马铃薯汁 |
0.1g/mL的NaOH溶液、0.05g/mL的CuSO4溶液 |
还原糖鉴定 |
|
| D |
菠菜叶 |
清水 |
叶绿体 |
（1）A2组中盐酸的作用是________________________________________。
（2）哪些实验观察内容肯定不能实现________________________________
(3)哪些实验用到显微镜________________________________
（4）B组和C组注入试剂以后，对试管液体的处理方法与有何不同？
___________________________________ _______________________
iPS细胞全称为诱导性多能干细胞，是由体细胞诱导而成的干细胞，具有发育的多潜能性，可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下为iPS细胞研究中的几个重要事件。
资料1：2007年，美日科学家利用病毒将“c－Myc”等4个基因植入人类皮肤细胞，发现皮肤细胞可转化为iPS细胞。
资料2： 2009年7月，我国科学家首次利用由体细胞诱导而成的iPS细胞，通过四倍体囊胚注射得到存活并具有繁殖能力的小鼠。
（1）美日科学家所利用的病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的 。 iPS细胞与__________细胞的特性最相近。
（2）皮肤取出后一般用胰蛋白酶等物质处理将细胞分散，而不用胃蛋白酶，原因是__________________________________________________________________
（3）皮肤细胞经诱导可形成iPS细胞，原因是_______________________________。
（4）在皮肤干细胞培养过程中，科研人员发现人工合成激素Ry可能引起细胞癌变。下面是关于这一问题的探究实验，请完善相应内容。
材料用具：含皮肤干细胞的培养液、适宜浓度的激素Ry溶液、显微镜、__________等
实验步骤：
①将皮肤干细胞培养液平均分成2组，编号为A、B。
②B组培养液中添加少量___________，A组培养液不添加。
③将A、B两组干细胞置于相同的培养条件下培养72小时。
④取样，分别染色、制片，在显微镜下观察__________________________________________。
结果与结论预测：如果____________________________，说明激素Ry能引起细胞癌变。
自然界中的两种微生物，可以通过各自不同的作用将培养液中的葡萄糖转化为维生素C，其过程如下图所示。请根据以上信息回答下列问题。
（1）从图中分析，欧文氏菌和棒状杆菌的同化作用类型是_________________。
（2）若利用生物技术改造上述两种菌中一种，使其可直接利用D-葡萄糖生成2-二酮基-L-古龙酸，最好采用_________技术，原因是____________________________________________。
（3）应用PCR技术可以对相关基因进行体外大量扩增。此过程需在一定的缓冲溶液中进行，反应体系中应提供_______________，同时，通过控制条件使DNA复制在体外反复进行。