(10分)研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法,请分析回答下列问题:
(1) 从肝细胞中分离总RNA,经_________获得cDNA,之后经过_________扩增内皮抑素基因。
(2) 扩增的目的基因与PUC18质粒(如图14所示)都用EcoRI和BamH I进行双酶切,然后用DNA连接酶进行连接,构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接,还减少了________的连接,提高了重组质粒的比例。
(3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。
选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入_______物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成______________颜色的菌落,原因是_____________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌,其突出的优点是:___________________________________
(4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养,获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板,370C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中,72h后在显微镜下观察细胞存活情况并,______________实验结果如下表所示。
结果说明__________________________________________
请依据所做的相应实验,回答下列问题:
Ⅰ.依据“检测生物组织中是否含还原糖、脂肪和蛋白质”的实验。将下列试剂、待检物质及相应的颜色显现用线连接起来。
所用试剂待检物质颜色显现
双缩脲试剂蛋白质紫色
斐林试剂脂肪橘黄色
苏丹III染液还原糖砖红色
Ⅱ.下图为人体中3种有机物的组成,依据主要功能分析,写出各字母所代表的物质:
A_________B_________
C_________D_________
E_________ F_________
运用DNA分子结构和复制的有关知识,回答下列问题:
(1)DNA分子的基本组成单位是______________。
A.核酸 | B.脱氧核苷酸 | C.核糖核苷酸 | D.磷酸 |
(2)DNA分子两条链按反向平行方式盘旋成_____________结构。
(3)DNA分子的复制发生在细胞有丝分裂和减数第一次分裂前的期。
(4)DNA分子复制是一个边解旋边复制的过程,在新合成的DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,这种复制方式叫复制。
(5)DNA分子中,碱基之间的配对按照_______________原则配对。
下图是能进行光合作用与呼吸作用的植物细胞中能量的转换过程。试运用所学知识回答下列问题:
(1)图中A表示作用,它包括反应与反应两个阶段。
(2)图中B表示作用。它的全过程可以概括地分为三个阶段,其中第一阶段所完成的物质变化是下列哪项?。
A.葡萄糖分解为丙酮酸,产生少量的[H]和少量的ATP;
B.丙酮酸和水彻底分解成二氧化碳和[H]并合成少量ATP;
C.[H]与氧结合生成水并合成大量ATP。
下图是动物细胞的亚显微结构图,请据图回答
(1)判断是动物细胞,是因为它具有[ ],而没有
(2)与分泌蛋白质等的分泌活动直接有关的细胞器是[ ]。
(3)图中[ ]是细胞内物质运输的网络和通道。
(4)[ 1 ]是进行呼吸、产生大量ATP的细胞器。
(5)主要由于有的存在,可以判定该细胞是真核细胞。
(6)蛔虫细胞不具有图示中的[ ],原因是
(7)图中的细胞器在完成生理功能活动过程中能净生成水的是[ ]。
请回答有关绵羊遗传与发育的问题:
(1)假设绵羊黑面(A)对白面(a)为显性,长角(B)对短角(b)为显性,两对基因位于染色体上且独立遗传。
①在两组杂交试验中,I组子代只有白面长角和白面短角,数量比为3:1;II组子代只有黑面短角和白面短角,数量比为1:1。其亲本的基因型组合是:I组,II组。
②纯种与非纯种的黑面长角羊杂交,若子代个体相互交配能产生白面长角羊,则杂交亲本的基因型组合有。
(2)假设绵羊的面色性状属于细胞质遗传,则不同面色的羊杂交,其后代面色性状(填“能”或“不能”)出现一定分离比。
(3)克隆羊多利是将多塞特母羊的乳腺细胞核注入苏格兰羊的去核卵细胞中,将此融合卵细胞培养后植入母羊体内发育而成。
①比较三种细胞内的X染色体数:多赛特羊交配后产生的正常受精卵多利羊的体细胞苏格兰羊的次级卵细胞(填“>”、“”、“<”、“
”、或“=”)。
②已知哺乳动物的端粒(由DNA组成的染色体末端结构)在个体发育开始后,随细胞分裂不断缩短。因此,多利的端粒长度应比普通同龄绵羊的。