在土壤中存在着多种自生固氮菌，它们对于增加土壤中的氮素有重要意义。某生物兴趣小组的同学想从土壤中分离出自生固氮菌，配制的培养基成份为：葡萄
糖10g、磷酸二氢钾0.2g、硫酸镁0.2g、氯化钠0.2g、硫酸钙5g、蒸馏水1000mL，并
在培养基中加入1%的琼脂，制成固体培养基。分离实验的过程如下图，其中器皿中①是
土壤样品，②是土壤悬浮液，③、④和⑤都是培养基。请回答：
1．从培养基的功能来分，本实验所配的培养基属于 培养基，碳源为 。
2．实验原理是 
。
3．④中培养出来的菌落是 微生物，其氮源来自于 。
4．②→③接种的方法是 法；④→⑤接种的方法是 法。
5．④→⑤
接种操作的目的是 。接种到⑤的过程中为防止污染应
注意的操作事项是 。
6．如实验使用的是通用培养基用于分离真菌，则培养基中应加入___________；若用于鉴别大肠杆菌，可在通用培养基中加入______________。
牛胚胎移植的基本程序如下图，请据图回答：
(1)图中a、b、c过程分别是指__________、____________、______________。
(2)供体牛的主要职能是___________；受体母牛必须具备_____________。
(3)为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是______；处理的时期是________；理由是____________________________。
(4)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有________________________________________。
(5)你认为胚胎移植技术在生产实践中的主要意义有哪些？
_____________________________________________。
通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术可使羊奶中含有人体蛋白质，下图表示这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G↓GATCC—，请回答：
(1)从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是________________，人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中需要的酶是_____________________________________________。
(2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。
(3)人体蛋白质基因之所以能连接到羊的染色体DNA中，原因是_________________________，
人体蛋白质基因导入羊细胞时常用的工具是_______________________________________。
(4)此过程中目的基因的检测与表达中的表达是指
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)你认为此类羊产的奶安全可靠吗？理由是什么？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：
(1)要获得该抗病基因，可采用__________、__________等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的运载体是__________。
(2)要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用__________进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为
，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是( )
(3)切割完成后，采用__________将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为__________。
(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去__________棉花细胞，利用植物细胞具有的__________性进行组织培养，从培养出的植株中__________出抗病的棉花。
(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是( )
| A．淀粉 | B．脂类 |
| C．蛋白质 | D．核酸 |
(6)转基因棉花获得的__________是由该表达产物来体现的。
目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示。
(1)构建人工质粒时要有抗性基因，以便于________。
(2)pBR322分子中有单个EcoRⅠ限制酶作用位点，EcoRⅠ只能识别序列—GAATTC—，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
(3)pBR322分子中另有单个的BamHⅠ限制酶作用位点，现将经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因，通过DNA连接酶作用恢复________键，成功地获得了重组质粒。说明____________________________________________________。
(4)为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是____________，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是________________。
芦笋雌（XX）、雄（XY）异株，但X、Y形态大小几乎无差异。请分析下列资料，回答相关问题。
资料一：芦笋雄株产量高，研究人员为筛选出雄性种子，对芦笋的Y染色进行了研究，发现有S和K两段特殊序列只存在于Y染色体上（如图），因而可通过检测它们而判断雄性个体。
（1）从特殊序列与性别基因的距离以及同源染色体的交叉互换两个角度看，更适合作为检测性别的特殊序列是序列。
（2）检测过程中，要Y染色上截取某特殊序列，再以其为模板人工合成含32P的特殊序列单链，然后用该单链与大量的待检DNA单链“杂交”，若出现（填结果），则证明待检种子为雄性，整个检测过程涉及的酶有（写出两种）。
资料二：不同品种的芦笋对不同癌症的抵抗力有差异，品种Ⅰ表现高抗肝癌（用A表示），品种Ⅱ表现高抗胃癌（用B表示），A、B均位于常染色上。纯合品种Ⅰ、Ⅱ杂交得F1，取F1花粉粒离体培养，统计单倍体幼苗的表现型及比例，结果为双高抗：高抗肝癌：高抗胃癌=1：1：1。
（3）单倍体幼苗不出现双低抗类型的原因是。
（4）若让F1 中的雄株与变种Ⅱ雌株交配，则子代中双高抗比例是。
（5）将癌细胞培养在含芦笋抗癌因子和3H标记的胸腺嘧啶的细胞培养液中，结果显示癌细胞中几乎没有放射性，由此推测，芦笋抗癌因子的作用机理是。
资料三：芦笋的性别由一对位于性染色体上的等位基因（M、m）决定。雄株开雄花，雌株开雌花，但极少数雄株偶尔开两性花，这种植株叫雄性雌型株（无变异），雄性雌型株自交，子代的雄株：雌株=3：1。
（6）分析资料三可知，芦苇的雄性是（显性/隐性）。
（7）请写出雄性雌型株自交后代出现雄株：雌株=3：1的遗传图解（要求写出配子）。