为了快速培育抗某种除草剂的水稻，育种工作者综合应用了多种育种-优题课

下图表示转基因牛的培育过程。请据图回答问题。

（1）在正常的生殖过程中判断卵子是否受精的标志是。
（2）采集来的卵母细胞一般要培养到时期，才能和获能的精子受精。
（3）流程A和B分别指和。A过程应保证发育到阶段，才能进行B操作。方法C称。
（4）为同时获得多个完全相同的子代个体，可在进行B操作之前进行。若要对A进行长期保存，应将其置于______________条件下。
（5）在A中可以获得大量胚胎干细胞，其在功能上具有发育的。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？。
原因是。
（2）过程②称为。
（3）为使过程⑧更易进行，可用处理D。
（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是。（2分，）
②在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是。
（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是。除酶外还需要加入引物，其作用是。

运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而人类染色体则逐渐丢失，只剩一条或几条。右图是人的缺乏 HGPRT 酶突变细胞株（ HGPRT^-）和小鼠的缺乏 TK 酶细胞株（ TK ^一）融合后并在 HAT 培养液中培养的过程，结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有 3 号染色体或17 号染色体或两者都有。已知只有同时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才可在 HAT 培养液中长期存活与繁殖。

（1）体细胞杂交克服了，过程 ① 使用的方法与植物原生质体融合相同的是。在细胞融合过程中，细胞核的融合是通过分裂完成的。
（2）过程 ② 中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的，此外还要定期用处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。培养的温度要控制在。
（3）HAT 培养液严格按照细胞所需营养种类和数量配制，从该角度可以判断该培养基是一种培养基。

已知蛋白质混合液中硫酸铵浓度的不同可以使不同种类的蛋白质析出，随着硫酸铵浓度增加，混合液中析出的蛋白质种类和数量增加。下表是某蛋白质混合液中的不同蛋白质从开始析出到完全析出所需要的蛋白质混合液中的硫酸铵浓度范围。

蛋白质混合液中的硫酸铵浓度（%）	析出的蛋白质
15～20	甲蛋白
23～30	乙蛋白
32～39	丙蛋白
36～40	丁蛋白

请据表回答：
（1）只完全析出甲蛋白，混合液中最合适的硫酸铵浓度应为　　　　　　　。
（2）向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液（或硫酸铵），使混合液中的硫酸铵浓度达到30%，会析出若干种蛋白质，它们分别是　　　　　　　　　　　　　。
（3）通过改变混合液中的硫酸铵浓度　　　　　（能、不能）从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的丙蛋白。
（4）如果蛋白质析出物中还含有一定量的硫酸铵，可用半透膜除去析出物中的硫酸铵。此方法在血红蛋白的提取分离实验中称为。纯化血红蛋白可以用方法，最后经方法进行纯度鉴定。

下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：

（1）选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用_________
时期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过____________来确定花粉是否处于
合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是____________。
（2）将所取的花蕾先用70%的酒精浸泡后还要放在质量分数为0.1%溶液中进行消毒，经适当处理后接种在已灭菌的培养基上。
（3）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中。
(4)培养几天后发现少数培养基被污染，若是有绒毛状、白色丝状菌落，属于真菌污染。从中可以选择出用于腐乳的制作。请完成腐乳制作的实验流程图：。
( 5）若用该方法在实验室培养胡萝卜植株，为提高成功率，取材的部位最好是。如果要从胡萝卜中提取胡萝卜素所使用的方法是，并用方法进行鉴定。