某湖泊由于大量排入污水，连续多次发生蓝藻爆发，引起水草死亡，周边居民也有出现某种有毒物质中毒现象的。请回答：
（1）湖泊中导致蓝藻爆发的主要非生物因素是过量的____________。导致水草死亡的主要原因是水草生长的环境中缺少____________和____________这两种非生物因素。
（2）某小组分别于早晨和下午在该湖泊的同一地点、同一水层取得两组水样，测得甲组pH为7.3，乙组pH为6.0，那么取自早晨的水样是_________组，理由是_______________，甲组水样中的O2含量______乙组的含量（大于 小于 等于），理由是_________________ __ _____
（3）如果居民中毒是由于蓝藻有毒物质经食物链的传递引起的，这类食物链中含有的四个营养级的食物链是___________→____________→____________→人。
科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基
因的大肠杆菌的过程。请据图回答：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是。
（2）经过①和②步骤后，有些质粒上的基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。
（3）步骤③是的过程。为了促进该过程，应该用处理大肠杆菌。
（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 。能在C中生长的大肠杆菌有种。
（5）步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”）上，请在图中相应的位置上圈出来。
己知某哺乳动物棒状尾(A)对正常尾(a)为显性；直毛(B)对卷毛(b)为显性；黄色毛(Y)对白色毛(y)为显性，但是雌性个体无论基因型如何，均表现为白色毛。三对基因均位于常染色体上，并遵循基因的自由组合定律。请回答：
①如果一只黄色个体与一只白色个体交配，生出一只白色雄性个体，则父本、母本、子代个体的基因型分别是：父本、母本、子代
②现有足够的直毛棒状尾雌雄个体(纯合，杂合均有)，要选育出纯合卷毛棒状尾的雌性个体，请简要写出步骤和判断方法：
步骤：
判断方法：
某单子叶植物的非糯性（B）对糯性（b）为显性，抗病（R）对不抗病（r）为显性，花粉粒长形（D）对圆形（d）为显性，三对等位基因位于三对同源染色体上。非糯性花粉遇碘液变蓝色，糯性花粉遇碘液呈棕色。现提供以下4种纯合亲本：
| 亲本 |
性状 |
| 甲 乙 丙 丁 |
非糯性 抗病 花粉粒长形 非糯性 不抗病 花粉粒圆形 糯性 抗病 花粉粒圆形 糯性 不抗病 花粉粒长形 |
（1）若采用花粉形状鉴定法验证基因的分离定律，可选择亲本甲与亲本_____ _____杂交。
（2）若采用花粉鉴定法验证基因的自由组合定律，杂交时可选择的亲本组合有，将杂交所得的F1的花粉涂在载玻片上，加碘液染色，置于显微镜下观察，统计花粉粒的数目，预期花粉粒的类型及比例为：。
（3）利用提供的亲本进行杂交，F2能出现非糯性、抗病、花粉粒圆形植株的亲本组合有_________ _，其中F2出现非糯性、抗病、花粉粒圆形植株比例最高的亲本组合是____ __；在该组合产生的F2表现型为非糯性、抗病、花粉粒圆形的植株中，能稳定遗传的个体所占的比例是________ _。
请回答基
因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为。
②在第轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。
①第1组：引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效
；②第2组：。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为。
(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。
为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法：
请根据图示信息回答:
（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有、等。（2）用来促进B牛多排卵的激素可能是分泌的促性腺激素。对D牛要进行
处理。此外受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；判断卵子是否受精的标志是。在受精的过程中，首先发生反应释放出有关的酶直接溶解卵丘细胞之间的物质。防止多精入卵的生理反应有。E牛的性别是。为了确保得到所需性别的试管牛，往往需要对移植前的胚胎进行性别鉴定，请举出两种对早期胚胎进行性别鉴定的方法（只需写出名称或简要原理）。
（3）产生F牛的理论依据是，其生殖方式属于。请再举一例克隆牛的培育技术。（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立的生产生长素的乳房生物反应器，即：科学家将重组在一起，通过等方法，导入牛的 中，转基因牛乳腺细胞中含有较多的参与分
泌物加工的等细胞器。