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肺细胞中的let一7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞实现表达增强后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

(1)进行过程①时,需用            酶切开载体以插入let一7基因。进行过程②时,需用        酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于 细胞培养。采用PCR技术扩增let一7基因时,在PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在该反应体系中,目的基因扩增了5代,则具有引物I的DNA所占的比例理论上为       
(2)研究发现,let一7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取   进行分子杂交,以直接检测1et一7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中   (RASmRNA/RAS蛋白质)含量减少引起的。
(3)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶切开后得到仍是长度为1000 bp的DNA分子,说明此DNA分子的形态为                 
(4)某线性DNA分子分别用限制酶Hind Ⅲ和Sma I处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(kb为千个碱基对):

限制酶
   片段及长度
Hind Ⅲ
    2.5 kb,5.0 kb
Sma I
    2.0 kb,5.5 kb
Hind Ⅲ和Sma I
    2.5 kb,3.0 kb,2.0 kb

可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分别有           个识别序列。两酶同时处理后得到的片段,再用限制酶EcoR I处理,结果导致凝胶上3.0 kb的片段消失,产生一种1.5 kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割,则可得到长度分别为          的片段。

科目 生物   题型 综合题   难度 中等
知识点: 生物技术中的伦理问题
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某生物社团为了探究环境因素对培养液中酵母菌种群数量变化的影响,按下表完成了有关实验,并定期对培养液中的酵母菌进行计数。请分析回答.

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①用滴管吸取样液前,应将培养酵母菌的试管轻轻震荡几下,目的是_____________,防止实验结果出现较大误差。
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(代表酵母菌)
③血球计数板使用完后,用_________,切勿用硬物洗刷。
④该生物社团同学连续7天测定酵母菌种群数量,试管A的数据如下表所示,请据此画出酵母菌种群数量的柱形图_________。


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(1)图中有__________ 条食物链,其中鹰属于__________营养级。
(2)流经该生态系统的总能量是__________。
(3)在草→兔→鹰的食物链中,如果鹰体内的能量增加1. 6×l05 kJ,能量在相邻两个营养级间的传递效率为10%-20%,则至少消耗草体内的能量是__________kJ。
(4)影响图中兔种群数量变化的种间因素是________________________。
(5)若该地土壤受到污染,则__________体内的污染物积累浓度可能最高。

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