(13分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越__________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是____________________________________________________________________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_____________________________________________________________________
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_______酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______________________________________
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在____________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
（8）cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得__________作为模板，在__________的催化下合成cDNA探针
（9）基因工程中利用乳腺生物反应器生产
-抗胰蛋白酶，应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体，并用__________方法导入__________中，再利用SRY探针 （Y染色体上的性别决定基因）进行检测，将检测反应呈__________（选填“阳”、“阴”）性的胚胎进行移植培养。
2011年，美国科学家借助恒河猴的抗艾滋病毒基因对家猫DNA进行改造，同时利用荧光水母的基因培育出抗艾发光猫。以期找到治疗艾滋病的手段，具体培育流程如下图。请回答：
（1）题中基因工程的目的基因是_______；如果培育的猫发出荧光，则可以确定抗艾滋病毒基因已经________。
（2）过程②常用的方法是_________，在过程③之前要对精子进行_________处理。
受精过程防止多精入卵的两道屏障是_____________。
（3）图中抗艾荧光猫又称试管动物，其生殖方式属于___________，图中________
（填数字）是试管动物技术的基本环节。
（4）若要在短时间内生产大量遗传组成相同的抗艾荧光猫，可采用的方法是_________，操作时要注意_________
（5）上述研究启示我们可以将恒河猴的抗艾滋病毒基因转入病人的某种细胞，经选择培养后输入患者体内，用于治疗艾滋病，这种方法称为___________。
下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：
（1）图中①过程所作的处理是，小鼠“B细胞”是_________细胞。
（2）图中过程②诱导细胞融合的生物因素是__________，细胞融合后还需要用_________筛选获得杂交瘤细胞。
（3）经过③过程可获得足够数量的能分泌所需抗体的D细胞，过程③包括______和等。
（4）培养D细胞时要根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配制培养基，此外经常会在培养基中加入。培养过程需在CO2培养箱中进行，目的是。
（5）D细胞既具有B细胞__________ 的特点，又能。
自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。2014年云南农大科研所利用先进的生物技术培育出世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪，其与体细胞克隆猪的培育流程比较如下图。请回答：
（1）图中过程_______（填序号）是获得孤雌生殖克隆猪的技术流程，其原理是_________。
（2）图中过程③④⑤⑥是运用_______技术获得体细胞克隆猪的流程，获得的后代更多表现出__________的优良性状。
（3）若要获得单个成纤维细胞进行培养，需用___________处理猪胚胎的部分组织。若要获得大量的卵母细胞需用________激素处理良种母猪。
（4）过程⑤的名称是_______，所选择的胚胎一般处于__________时期较合适。进行⑤过程之前，需要对代孕母猪进行________处理，为早期胚胎发育提供相同的生理环境。
白菜—甘蓝同普通白菜相比，具有生长期短、易储存等优点。下图为白菜—甘蓝的培育流程，请回答：
（1）图示培育白菜—甘蓝幼苗的技术称为_____________，依据的原理是______。
（2）过程②常用的化学诱导剂是___________。若只考虑原生质体两两融合，可以得到________种类型的的融合细胞。
（3）在___________的诱导和一定的营养条件下，经过程④_______________形成愈伤组织，该过程细胞的全能性如何变化？_________。
（4）过程④⑤开辟了植物繁育的新途径，该技术通常可用于、和制备人工种子。
市面销售的“蓝色妖姬”并不是真正的蓝玫瑰，是用对人体无害的染色剂浇灌快到花期的白玫瑰（或白月季）培育而成的。真正的蓝玫瑰，是将蓝三叶草的相关基因转入玫瑰后获得的。
（1）英语blue rose（蓝色玫瑰）有“不可能”之意，根本原因是正常玫瑰中缺少________________的基因。
（2）蓝三叶草中的某基因部分结构如图所示（a、b为不同酶的作用位点）。从图示看，限制酶作用的部位是_______（a或b），其识别的碱基序列为___________。
（3）将蓝三叶草的基因导入玫瑰体内前还需构建_______________，其目的是______________。常用的导入方法是__________。
（4）研发过程中要检测玫瑰的DNA上是否插入了目的基因，常采用_____________技术，如果显示出____________，就表明已经插入。