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题文

下图为单克隆抗体制备流程示意图。

(1)单克隆抗体制备技术的基础是________________________________。
(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是________________。在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的________,以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔滴入0.1 mL细胞稀释液,其目的是___________________________________。
(4)与一般的血清抗体相比,单克隆抗体的优点是                。 若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是                             

科目 生物   题型 综合题   难度 中等
知识点: 动物细胞工程的常用技术
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铁蛋白是细胞内储存多余Fe3的蛋白,铁蛋白合成的调节与游离的Fe3、铁调节蛋白、铁应答元件等有关。铁应答元件是位于铁蛋白mRNA起始密码上游的特异性序列,能与铁调节蛋白发生特异性结合,阻遏铁蛋白的合成。当Fe3浓度高时,铁调节蛋白由于结合Fe3而丧失与铁应答元件的结合能力,核糖体能与铁蛋白mRNA一端结合,沿mRNA移动,遇到起始密码后开始翻译(如下图所示)。回答下列问题:

(1)图中甘氨酸的密码子是。铁蛋白基因中决定“”的模板链碱基序列为
(2)Fe3浓度低时,铁调节蛋白与铁应答元件结合干扰了,从而抑制了翻译的起始;Fe3浓度高时,铁调节蛋白由于结合Fe3而丧失与铁应答元件结合能力,铁蛋白mRNA能够翻译。这种调节机制既可以避免对细胞的毒性影响,又可以减少
(3)若铁蛋白由n 个氨基酸组成,指导其合成的mRNA的碱基数远大于3n,主要原因是
(4)若要改造铁蛋白分子,将图中色氨酸变成亮氨酸(密码子为UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG),可以通过改变DNA模板链上的一个碱基来实现,即由

中心法则揭示了生物遗传信息由DNA向蛋白质传递与表达的过程。请回答下列问题
(1)b、c、d所表示的三个过程依次分别是
(2)在真核细胞中,a和b两个过程发生的主要场所是
(3)能特异性识别信使RNA上密码子的是,后者所携带的是

人类白化病(a)对正常(A)为隐性,并指(B)对正常(b)为显性,它们都属于常染色体遗传。如图是基因型为AaBb的某人体内一个细胞的分裂示意图(图中仅表示相关染色体的变化,假设相关染色体上没有发生过交叉互换和基因突变)。据图回答下列问题:

(1)在此分裂图中正确标出所有A(a)、B(b)基因。
(2)该细胞的名称是细胞,分裂完成时将生成4个子细胞,其基因型分别为。
(3)该个体细胞中,染色体数最多有条,此时染色体组的数目为。
(4)图中染色体1和2的关系是;若减数分裂过程中染色体1与2没有分开,则该细胞形成的生殖细胞中正常与异常的比值为。
(5)此人与基因型为Aabb的某人结婚,子代可能出现的基因型有种;这对夫妇生一个患病孩子的概率为。

人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

(1)htPA基因与载体用_________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。该重组表达载体还必须具有的启动子、终止子以及标记基因等。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射______ ____。采集的精子需要经过________,才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_________技术。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。移植后的胚胎能在代孕母羊子宫中存活的生理基础是。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的__________。
(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到________,说明目的基因成功表达。

研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________(填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如右图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建___________区基因,转入原核细胞表达并提纯。
(2)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与___________细胞进行融合,使用的化学诱导剂是______________,细胞融合的原理是_________________。
(3)将融合细胞在__________培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,吸取有克隆生长的细胞培养孔中的________(填“上清液”或“沉淀细胞”),应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过_____________或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。
(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。

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