科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，番茄耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点。下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(amp^r为抗氨苄青霉素基因)，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞，请据图作答。

（1）图中涉及的技术有：_______________________________(答出两点)。
（2）在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用__________________，分别对目的基因和质粒进行切割，切割后产生的DNA片段分别为_______、_______种。
（3）图中I amp^r基因的目的是________________，除了amp^r、鱼的抗冻蛋白基因以外，还应具有的结构是_____________、_______________。
（4）研究人员通常采用_____________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用_______________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。

科目 生物   题型 选择题   难度 中等

知识点： 生物技术中的伦理问题