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实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定甲、乙两种化学物质毒性,并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列实验报告并回答有关问题。
实验原理:有毒物质能诱导细胞产生变异,根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
实验材料:活的小白鼠胚胎。
药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液:把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入_________处理,使胚胎组织分散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养:
①取A、B、C三个洁净的培养瓶,_____       ______,加入等量的细胞悬浮液。
②向A培养瓶中加入化学物质甲,向B培养瓶中加入____________,向C瓶内加入等量的生理盐水,并将培养瓶摇匀。
③在实验中,C培养瓶起什么作用?___________。
(3)制作临时装片:
①当细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞__________,再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,用____________染色,3~5min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计:
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于_________期的细胞,并与C组对比以确认发生变异的细胞,同时统计___________________________。
(5)结果与结论:经研究人员实验得知:A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%,由此可知该实验的结论是__________________________________。

科目 生物   题型 综合题   难度 较难
知识点: 动物细胞工程的常用技术
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项目
试管l
试管2
试管3
0.5%的酪蛋白溶液
2mL
2mL
2mL
加缓冲液后pH
7.0
8.o
9.0
0.5%的胰蛋白酶溶液
lmL
1mL
lmL
水浴温度
40℃
40qC
40℃
实验结果 l



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上清液
沉淀物
匀浆


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甲是:_________,乙是:________,丙是:________
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甲是:_________,乙是:________,丙是:________
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