萤火虫发光是体内荧光素酶催化一系列反应所产生的现象。如果荧光素酶存在于植物体内,也可使植物体发光。一直以来荧光素酶的惟一来源是从萤火虫腹部提取。但加利福尼亚大学的一组科学家成功地通过转基因工程实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内,并在大肠杆菌体内产生荧光素酶。请你根据已有的知识回答下列有关问题:
(1)在此转基因工程中,目的基因是 ,具体操作过程中下图所示的黏性末端是由 种限制性核酸内切酶作用产生的。
(2)将此目的基因导入到大肠杆菌体内需要载体的帮助,则作为载体必须具备能够在宿主细胞内复制并稳定保存、以及 (至少答出两点)等条件。
(3)本实验中将目的基因导入大肠杆菌的载体可以是 (多选)。
A.质粒 | B.动物病毒 | C.噬菌体 | D.植物病毒 |
(4)在此转基因工程中,将体外重组DNA导入大肠杆菌体内,并使其在细胞内 的过程称为转化。最常用的转化方法是首先用Ca2+处理大肠杆菌,目的是 。
(5)目的基因在受体细胞是否能转录出mRNA,可用 技术来检测;目的基因是否表达出相应的蛋白质,除了通过大肠杆菌是否发光来确定外,还可以通过 特异性反应来判断。
下面是以小鼠为对象进行的研究工作,请分析回答问题:
(1)进行小鼠胚胎工程操作时,首先在光控周期下(光照14h,黑暗10h)饲养成年雌鼠,并注射促性腺激素,目的是。然后从雌鼠输卵管中取出卵子,在一定条件下培养成熟;并从雄鼠附睾中取出精子,在一定条件下培养一段时间,目的是。再在37℃,5%CO2条件下,精卵共同作用4h,冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化,第5天左右可以看到胚胎发生收缩,细胞间隙扩大,接着胚胎内部出现裂隙,这是胚胎发育中期开始的标志。
(2)如果体外受精后,在精核与卵核融合之前,用微型吸管除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是。
(3)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中,由重组细胞发育成小鼠丙,则小鼠丙的基因来源有。
(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵,则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠,有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因。
很久以前科学家在土壤中发现了某种细菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质,当时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中,以降低昆虫对农作物造成的危害。20世纪90年代,美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。下图为这一转基因玉米的主要培育过程,分析回答下列问题:
(1)获得特定目的基因的途径除了从该细菌中直接分离抗虫基因外,如果基因较小,核苷酸序列又已知,也可以通过化学方法进行。将目的基因与运载体结合时必须用酶和DNA连接酶。在基因工程中,常用的运载体有等。
(2)由转基因玉米细胞经过形成愈伤组织,然后发育成胚状体和试管苗。若要制备转基因玉米的人工种子,可选择上述实验过程中的再包裹合适的等。
从某种真核细胞中提取出大量核糖体,放入含有下列几种有机物(其中的氮都被15N标记)的培养液里,假设培养液里含有核糖体完成其功能所需的一切物质,且条件适宜。请回答:
(1)实验中,核糖体所需要完成的功能就是把上述五种物质中的[](填写编号)_____(填写物质名称),通过_______方式合成多肽(蛋白质),可以用______试剂检测,检测时__________(需要或不需要)加热。
(2)如果每个氨基酸都只被利用一次,上述合成的多肽含有__________个氨基和__________个羧基,称为________肽。
(3)假如该实验合成的多肽含20个15N,则该多肽最多有________个肽键。
(4)蛋白质具有多种多样的功能。细胞膜表面的糖蛋白与_______________功能有关。细胞核内蛋白质与DNA组成的_______________,在细胞有丝分裂的中期最易观察。
(5)实验中所用的培养液相当于细胞内的__________________。
右图为高等植物细胞亚显微结构示意图,请据图回答问题:
(1)如果此细胞为叶肉细胞,与能量转换有关的细胞器有[ ]和[ ]。在植物细胞的代谢过程中,ADP转化成ATP所需要的能量是由和(填生理过程)提供的。由ADP形成ATP的反应式是___________________。
(2)动物细胞与该细胞比较,特有的细胞器是_____________,其功能为___________________。
(3)如果此细胞为根毛细胞,可以通过的方式选择性吸收矿质离子,这种选择性与细胞膜上的有关。当土壤溶液浓度高于细胞液浓度时,结构[]中的水分会大量渗出细胞。此时,由于[A]的伸缩性有限,随时间延长,细胞将出现现象。
(4)若此细胞为根尖分生区的细胞,在有丝分裂间期,细胞内体积最大的结构是[E]中发生的主要物质变化是;在有丝分裂末期,[D]参与新细胞的细胞壁形成。
(12分,每空1分)紫外线辐射可使细胞产生活性氧和自由基,二者极不稳定,容易发生一系列的氧化连锁反应,所产生的某些氧化产物可以对细胞造成伤害。一些水果的果皮富含抗氧化剂,那么,果皮成分能保护细胞免受紫外线辐射的伤害吗?对此有人进行了实验探究。
(1)按下表配方配制接种液,然后使用接种环分别将菌种接种到4块培养基上。
培养基编号 |
接种液配方 |
a和d |
? +1mL无菌水 |
b和e |
3![]() |
(2)紫外线照射:将a、b、d、e四块已接种的培养基置于紫外灯正下方10cm处照射3min,然后立即用铝箔纸包住培养皿,放人37℃恒温培养箱中培养;…
(3)24h后,取出培养皿,观察、计数。
实验结果:
培养基编号 |
a |
b |
d |
e |
菌![]() |
2 |
50![]() |
327 |
537 |
讨论:
(1)在倒平板的操作过程中,应等待平板冷却凝固后,将平板放置。
(2)a、d培养基接种液的配方是+1mL无菌水。
(3)无菌技术的目的是和。
培养基的灭菌方法是。
(4)该实验微生物接种的方法是,计数方法是。
(5)本实验的因变量是。
(6)通过对实验结果的分析,可以得出的初步结论是。
(7)为提高本实验的可信度,下一步需要做的是。