(10分)某质粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。
（1）在构建重组质粒时，应选用 两种限制酶对 进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性。（每空2分）
（2）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入 ，理由是 。
（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用 技术，即通过 和 两个主要过程最终形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加 。
下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解，据图回答：
（1）图中①、②所示的结构分别是______________、_______________，④过程常用的方法是___________。
（2）图示治病的方法叫做_______________________，与一般的异体移植相比最大的优点是____________________。
回答下列问题：
(1)在果酒制作中，无氧条件下，酵母菌能进行发酵，其中温度是重要的控制条件，在左右的温度是最适合酵母菌繁殖。在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的酵母菌；在果醋的制作中，当氧气、糖源都充足时，醋酸杆菌会将葡萄汁中的糖分分解成。
(2)在制作腐乳时，有多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是，这些微生物产生的能将豆腐中的蛋白质分解成小分子物质；脂肪酶可将脂肪水解为
和。
(3)通过花粉培养产生花粉植株的途径一般有两种：一是花粉通过阶段发育为植株，另外一种是花粉在诱导基上先形成，再将其诱导分化成植株；这两种途径之间没有绝对界限，主要取决于培养基中激素的及其。
(4)植物芳香油的提取方法有、和等方法，具体采用要根据植物原料的特点来决定。
基因工程自20世纪70年代兴起后，发展迅猛，成果显著。
Ⅰ利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是 ______。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为 __________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质，常用______________________技术。
Ⅱ近10年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室的一种常规手段，下图为PCR原理示意图，据图回答问题。
（1）基因工程中，利用PCR技术来________________，PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制，生物体内也能完成DNA的复制，但有所不同，图中A过程称为____________，在生物体内需要____________才能完成。图中B 过程的完成需要_________等条件。
（2）若DNA样品的长度为100个碱基对，且A占15%，则完成三次循环，共需要提供的胞嘧啶脱氧核苷酸___________个。
动物血液常常被选作提取DNA和提取血红蛋白的实验材料，请回答下列有关问题：
（1）提取DNA和提取血红蛋白，猪血都是适宜材料吗？为什么？；
（2） 无论是提取DNA还是提取血红蛋白，都需要先用对红细胞进行洗涤， 其目的是；
（3）电泳是分离鉴定蛋白质的常规方法。下图为几种蛋白质通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱，据图，你认为相对分子质量最大的蛋白质是，依此推理在该样品在凝胶色谱法中最后流出的蛋白质应该是。
果汁是日常生活中的常用饮料，为提高果汁的出汁率及使果汁变得澄清，在果汁生产中常用到果胶酶。请根据有关材料回答下列问题：
(1)下面是A同学探究温度对果胶酶活性影响的实验步骤：
用搅拌器制苹果泥，适量且等量的注入到编号为1、2、3、4、5、6的6支试管中；
分别向这6支试管依次注入适量且等量的果胶酶溶液，并混合均匀；
将6支试管分别放入25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃的恒温水浴保温10 min；
过滤，比较获得果汁的体积。
①上述实验中步骤有两处明显不严谨，请指出并改进；
②有同学认为该实验缺乏对照，应补充一组果汁和蒸馏水相混合的实验，你认为有没有必要？说明理由________。
（2）B同学探究的是35℃和45℃下果胶酶的最适用量，他在实验过程中除了温度以外还应
该控制等因素保持不变(列举两个)。下表是该同学的实验结果，请根据他
的实验结果画出曲线，并得出结论。
| 0 |
0.2% |
0.4% |
0.6% |
0.8% |
1.0% |
|
| 35℃ |
27% |
40% |
52% |
65% |
65% |
65% |
| 45℃ |
27% |
35% |
42% |
42% |
42% |
42% |