下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。
（1）此基因工程中的目的基因是________________________，将人工合成的DNA片段拼接在一起，所需要的酶有________________________________。
（2）要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用_________技术。
（3）试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列，为什么可以避免胰岛素在植物细胞中的降解？_____________________________________________________。
（4）用目的基因与农杆菌的Ti质粒结合构建表达载体，该表达载体的组成中不应含有的是_________（从下列选项中选择）。
①目的基因 ②CaMV 35S启动子 ③果实专一性启动子2A12 ④RNA引物
⑤标记基因 ⑥T-DNA ⑦RNA聚合酶基因片段 ⑧终止子
回答下列有关生物工程技术问题。
（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用分别切割
和，再用进行连接。
（2）体内受精作用进行时防止多精入卵的机制有和。
（3）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于的环境，在营养方面通常需要在培养基中加入等天然成分。细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C02的主要作用是。
Ⅰ．家猫中有很多对性状值得人们关注和研究，如有尾与无尾（由一对等位基因A、a控制）、眼睛的黄色与蓝色（由另一对等位基因B、b控制）。在上述两对性状中，其中某一对性状的纯合基因型的合子不能完成胚胎发育。现从家猫中选择多只表现型相同的雌猫和多只表现型相同的雄猫作亲本，杂交所得F1的表现型及比例如下表所示，请分析回答：
| 无尾黄眼 |
无尾蓝眼 |
有尾黄眼 |
有尾蓝眼 |
|
| ♂ |
2/12 |
2/12 |
1/12 |
1/12 |
| ♀ |
4/12 |
0 |
2/12 |
0 |
（1）基因是有片段，基因具有结构，为复制提供了精确的模板，复制时遵循原则，从而保证了复制准确进行。基因储存的遗传信息指的是。
（2）家猫的上述两对性状中，不能完成胚胎发育的性状是，基因型是（只考虑这一对性状）。
（3）控制有尾与无尾性状的基因位于染色体上，控制眼色的基因位于染色体上。判断的依据是。
（4）家猫中控制尾形的基因与控制眼色的基因在遗传时遵循定律；亲本中母本的基因型是，父本的基因型是。
Ⅱ．某农业研究所将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因（Bt基因）导入棉花，筛选出Bt基因成功整合到染色体上的抗虫植株（假定Bt基因都能正常表达）。某些抗虫植株体细胞含两个Bt基因，这两个基因在染色体上的整合情况有右图所示的三种类型（黑点表示Bt基因的整合位点）。让这些含两个Bt基因抗虫的植株自交，后代含抗虫基因的个体所占的比例是：甲，乙，丙。
Ⅰ．下图甲为叶绿体结构模式图，图乙是从图甲中取出的部分结构放大图，回答下列问题。
（1）图甲结构③是，结构④是，大大增大了叶绿体内膜面积的是图甲结构中的（填数字），而线粒体是通过形成来增大内膜面积。
（2）图乙结构除含有捕获光能的光合色素外，还有催化光合作用阶段的酶。
（3）某同学在做“绿叶中色素的提取和分离”实验时，应依据的原理提取绿叶中色素，采用法分离色素。如果滤纸条上的色素带颜色较浅，其原因可能是、（至少答2点）。
Ⅱ．下图甲表示某植物叶肉细胞内两个重要的生理过程，图乙表示在二氧化碳充足的条件下，某植物光合速度与光照强度和温度的关系, 图丙表示某植物的非绿色器官在氧浓度为a、b、c、d时，CO2释放量和O2吸收量的关系。请回答下列问题：
（1）图甲中，③过程进行的场所是，④过程进行的场所是。图示中[H]用于。①～④过程中，能为该细胞合成蛋白质供能的过程是。
（2）图乙在温度为20℃时，光照强度大于千勒克司后，该植株光合速度不再随光照强度增加而增加。当温度为30℃、光照强度小于12千勒克司时，限制该植株光合速度的主要环境因素是。
（3）图丙在a、b、c、d四种浓度中,最适合该植物器官储藏的氧浓度是，若细胞呼吸的底物是葡萄糖，则在氧浓度为b时，无氧呼吸消耗葡萄糖的量是有氧呼吸消耗葡萄糖的量的倍。
2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家。科学家把c –Myc等4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成诱导多能干细胞——iPS细胞，这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞。
（1）基因工程中经常使用的工具酶是_______常用的载体除了动植物病毒外还有______和_____。
（2）若想增强载体病毒颗粒的感染性，可利用__________技术改造病毒外壳蛋白，直接对______进行操作。
（3）应用____技术得到重组细胞，激活重组细胞发育成早期胚胎，使用从_____中获得的胚胎干细胞，在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进其_____得到各种组织器官，用于治疗某些疾病，这种技术称为____________________。
（4）iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此不会像生殖性克隆一样引发__________问题。
（5）iPS细胞在体外已成功地被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，究其本质原因是基因_________________的结果。
下列是对土壤微生物开展探究恬动的三个案例，请在相应的空白处作答。
（1）案例I：探究落叶在土壤微生物的作用下是否发生腐烂（分解）。
设计思路：
| 组别 |
对照组 |
实验组 |
| 处理情况 |
不做任何处理的带落叶的土壤 |
处理过的带落叶的土壤 |
| 将等量的带落叶的土壤，用带有编号的相同的塑料袋分别包扎好，并埋在5cm深的土壤中 |
对实验组土壤应该进行__________处理，尽可能排除__________的作用。
（2）案例II：探究土壤微生物对淀粉的分解作用。
实验步骤：
①将取自农田的土壤制成土壤浸出液，放在烧杯中静置一段时间。
②另取两只烧杯，编号为A、B，放入等量的淀粉糊。在A烧杯中加入30 mL土壤浸出液，B烧杯中加入__________。
③在室温条件下放置7天后，从A烧杯中取20 mL溶液，分别加入A1和A2两支试管各10 mL；从B烧杯中取20 mL溶液，分别加入B1和B2两支试管各10mL。
④在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入__________，并进行__________处理。
⑤观察各试管的__________，记录实验结果。
（3）案例III：探究土壤微生物中是否含有分解纤维素的细菌的实验过程中，应将土壤浸出液接种在以__________为唯一碳源的培养基上，并用__________（试剂）加以鉴别。