（7分，每空1分）如右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内-优题课

（7分，每空1分）如右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能否得到表达的探究：

(1)将目的基因和质粒相结合形成重组质粒 (重组DNA分子) 需要的工具为：           。
(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒，有的导入的是普通质粒A，只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是                                 。
(3)若把通过鉴定证明导入了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养，会发生的现象：有的能生长；有的不能生长。导入普通质粒A的细菌    （能或不能）生长，因为                       ；导入重组质粒的细菌    （能或不能）生长，因为                                 。
(4)导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是受体细胞通过转录和翻译过程形成               这种蛋白质。

科目生物题型综合题难度较易

知识点：生物技术中的伦理问题

重庆石柱是我国著名传统中药黄连的主产区之一，黄连生长缓慢，存在明显的光饱和（光合速率不再随光强增加而增加）和光抑制（光能过剩导致光合速率降低）现象。

（1）探寻提高黄连产量的技术措施，研究人员对黄连的光合特征进行了研究，结果见图1。

①黄连的光饱和点约为________ $u m o l * m^{- 2} * s^{- 1}$ 。光强大于 $1300 u m o l * m^{- 2} * s^{- 1}$ 后，胞间二氧化碳浓度增加主要是由于________。

②推测光强对黄连生长的影响主要表现为_____。黄连叶片适应弱光的特征有______（答2点）。

（2）黄连露天栽培易发生光抑制，严重时其光合结构被破坏（主要受损的部位是位于类囊体薄膜上的色素蛋白复合体），为减轻光抑制，黄连能采取调节光能在叶片上各去向（题图2）的比例，提升修复能力等防御机制，具体可包括________（多选）。

①叶片叶绿体避光运动

②提高光合产物生成速率

③自由基清除能力增强

④提高叶绿素含量

⑤增强热耗散

（3）生产上常采用搭棚或林下栽培减轻黄连的光抑制，为增强黄连光合作用以提高产量还可采取的措施及其作用是_____。

LHON是线粒体基因A突变成a所引起的视神经疾病。我国援非医疗队调查非洲某地LHON发病情况，发现如下谱系。

（1）依据LHON遗传特点，Ⅲ-7与正常女性婚配所生子女患该病的概率为______。

（2）调查发现，LHON患者病变程度差异大（轻度、重度），且男性重症高发。研究发现，该特征与X染色体上的基因B突变成b有关。某轻度病变的女性与正常男性结婚，所生男孩有轻度患者，也有重度患者，其中重度患者核基因型为______。

（3）5'-CCCGCGGGA-3'为B基因的部分编码序列（非模板链），C为编码序列的第157位，突变成T后，蛋白序列的第______位氨基酸将变成______。

部分氨基酸密码子：丙氨酸（GCG）、缬氨酸（GUG）、色氨酸（UGG）、精氨酸（CGC或CGG或CGU）

（4）人群筛查发现， $X^{b} X^{b}$ 基因型在女性中的占比为 $0.01 %$ ，那么 $X^{b} Y$ 基因型在男性中的占比为______。

（5）镰状细胞贫血是非洲常见的常染色体隐性遗传病，每8个无贫血症状的人中有1个携带者。无贫血症状的Ⅲ-9（已知Ⅱ-5基因型为 $X^{B} Y$ ，Ⅱ-6基因型为 $X^{B} X^{b}$ ）与基因型为 $X^{B} Y$ 的无贫血症状男性结婚，其子代为有镰状细胞贫血症状的LHON重度患者的概率为______。

金黄色葡萄球菌（简称Sa）是人体重要致病细菌、不规范使用抗生素易出现多重抗药性Sa。

（1）Sa产生抗药性可遗传变异的来源有______（至少答出2点）。

（2）推测Sa产生头孢霉素抗性与其R基因有关。为验证该推测，以图1中R基因的上、下游片段和质粒1构建质粒2，然后通过同源重组（质粒2中的上、下游片段分别与Sa基因组中R基因上、下游片段配对，并发生交换）敲除Sa的R基因。

①根据图1信息，简述质粒2的构建过程（需包含所选引物和限制酶）：______，然后回收上、下游片段，再与SacII酶切质粒1所得大片段连接，获得质粒2。

②用质粒2转化临床分离的具有头孢霉素抗性、对氯霉素敏感的Sa，然后涂布在含______的平板上，经培养获得含质粒2的Sa单菌落。

③将②获得的单菌落多次传代以增加同源重组敲除R基因的几率，随后稀释涂布在含______的平板上，筛选并获得不再含有质粒2的菌落。从这些菌落分别挑取少许菌体，依次接种到含____________的平板上，若无法增殖，则对应菌落中细菌的R基因疑似被敲除。

④以③获得的菌株基因组为模板，采用不同引物组合进行PCR扩增，电泳检测结果如图2，表明R基因已被敲除的是______。

科学家在果蝇遗传学研究中得到一些突变体。为了研究其遗传特点，进行了一系列杂交实验。请回答下列问题：

（1）下列实验中控制果蝇体色和刚毛长度的基因位于常染色体上，杂交实验及结果如图1。

据此分析， $F_{1}$ 雄果蝇产生＿＿＿＿＿＿种配子，这两对等位基因在染色体上的位置关系为＿＿＿＿＿＿。

（2）果蝇 $A 1 、 A 2 、 A 3$ 为 $3$ 种不同眼色隐性突变体品系（突变基因位于Ⅱ号染色体上）。为了研究突变基因相对位置关系，进行两两杂交实验，结果如图2。

据此分析 $A 1 、 A 2 、 A 3$ 和突变型 $F_{1}$ 四种突变体的基因型，在相应的图中标注它们的突变型基因与野生型基因之间的相对位置（ $A 1 、 A 2 、 A 3$ 隐性突变基因分别用 $a l 、 a 2 、 a 3$ 表示，野生型基因用“ $+$ ”表示）。

（3）果蝇的正常刚毛（ $B$ ）对截刚毛（ $b$ ）为显性，这一对等位基因位于性染色体上；常染色体上的隐性基因 $t$ 纯合时，会使性染色体组成为 $X X$ 的个体成为不育的雄性个体。杂交实验及结果如图3。

据此分析，亲本的基因型分别为＿＿＿＿＿＿， $F_{1}$ 中雄性个体的基因型有＿＿＿＿＿＿种；若自由交配产生 $F_{2}$ ，其中截刚毛雄性个体所占比例为＿＿＿＿＿＿， $F_{2}$ 雌性个体中纯合子的比例为＿＿＿＿＿＿。

某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答下列问题：

（1）若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括水和　＿＿＿＿＿＿。

（2）现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽孢杆菌 $H$ ，其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽对＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的抑制效果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需在＿＿＿＿＿＿ $μ g • m L^{﹣ 1}$ 浓度区间进一步实验。

测试菌	抗菌肽浓度/（μg•mL^﹣¹）
测试菌	55.20	27.60	13.80	6.90	3.45	1.73	0.86
金黄色葡萄球菌	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	+	+
枯草芽孢杆菌	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	+	+
禾谷镰孢菌	﹣	+	+	+	+	+	+
假丝酵母	﹣	+	+	+	+	+	+

注：“+”表示长菌，“﹣”表示未长菌。

（3）研究人员利用解淀粉芽孢杆菌H的淀粉酶编码基因 $M$ 构建高效表达质粒载体，转入大肠杆菌成功构建基因工程菌 $A$ 。在利用 $A$ 菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产生淀粉酶 $M$ 。分析可能的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（答出两点即可）。

（4）研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、 $p H$ 以及＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（答出两点）等基本条件。肺类装配体形成过程中是否运用了动物细胞融合技术？＿＿＿＿＿＿（填“是”或“否”）。

（5）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ $M R S A$ ）是一种耐药菌，严重危害人类健康。科研人员拟用 $M R S A$ 感染肺类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对 $M R S A$ 引起的肺炎有治疗潜力。以下实验材料中必备的是＿＿＿＿＿＿。

①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体

② $M R S A$ 感染的肺类装配体

③解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽

④生理盐水

⑤青霉素（抗金黄色葡萄球菌的药物）

⑥万古霉素（抗 $M R S A$ 的药物）