为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构-优题课

为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒，如图1所示。请回答下列问题：

（1）分别进行 $P C R$ 扩增片段 $F 1$ 与片段 $F 2$ 时，配制的两个反应体系中不同的有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，扩增程序中最主要的不同是＿＿＿＿＿＿。

（2）有关基因序列如图2。引物 $F 2 ﹣ F 、 F 1 ﹣ R$ 应在下列选项中选用＿＿＿＿＿＿。

A．	$A T G G T G ﹣ ﹣ ﹣ ﹣ ﹣ C A A C C A$
B．	$T G G T T G ﹣ ﹣ ﹣ ﹣ C A C C A T$
C．	$G A C G A G ﹣ ﹣ ﹣ C T G C A G$
D．	$C T G C A G ﹣ ﹣ ﹣ ﹣ ﹣ C T C G T C$

（3）将 $P C R$ 产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，下列叙述错误的有＿＿＿＿＿＿。

A．	稀释涂布平板需控制每个平板 $30 ～ 300$ 个菌落
B．	抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高
C．	抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落
D．	抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化

（5）为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物 $F 1 ﹣ F$ 和 $F 2 ﹣ R$ 进行了 $P C R$ 扩增，质粒 $P 1 ～ P 4$ 的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有＿＿＿＿＿＿。

（6）对于 $P C R$ 产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因测序确认，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

科目生物题型实验题难度中等

为探究不同因素对尿量的影响,某同学用麻醉后的实验兔进行不同的实验,实验内容如下:

a.记录实验兔的尿量(单位:滴/分钟)

b.耳缘静脉注射垂体提取液0.5mL,记录尿量

c.待尿量恢复后,耳缘静脉注射20%葡萄糖溶液15mL,记录尿量,取尿液做尿糖定性实验。

回答下列问题：

（1）该同学发现,与a相比,b处理后实验兔尿量减少,其主要原因是________，

（2）c处理后,肾小管腔内液体的渗透压会升高,实验兔的尿量会________，取尿液加入斐林试剂做尿糖定性实验出现砖红色,说明尿液中含有________。

（3）若某实验兔出现腹泻,尿量减少现象,导致尿量减少的主要原因是血浆渗透压升高,刺激了存在于________的渗透压感受器,从而引起尿量减少。

根据遗传物质的化学组成，可将病毒分为RNA病毒和DNA病毒两种类型．有些病毒对人类健康会造成很大危害，通常，一种新病毒出现后需要确定该病毒的类型．

假设在宿主细胞内不发生碱基之间的相互转换，请利用放射性同位素标记的方法，以体外培养的宿主细胞等为材料，设计实验以确定一种新病毒的类型，简要写出：

（1）实验思路.

（2）预期实验结果及结论即可．（要求：实验包含可相互印证的甲、乙两个组）________

某种植物的果皮有毛和无毛、果肉黄色和白色为两对相对性状，各由一对等位基因控制（前者用D、d表示，后者用F、f表示），且独立遗传．利用该种植物三种不同基因型的个体（有毛白肉A、无毛黄肉B、无毛黄肉C）进行杂交，实验结果如下：

回答下列问题：

（1）果皮有毛和无毛这对相对性状中的显性性状为________，果肉黄色和白色这对相对性状中的显性性状为________．

（2）有毛白肉A、无毛黄肉B和无毛黄肉C的基因型依次为________．

（3）若无毛黄肉B自交，理论上，下一代的表现型及比例为________．

（4）若实验3中的子代自交，理论上，下一代的表现型及比例为________．

（5）实验2中得到的子代无毛黄肉的基因型有________．

BTB是一种酸碱指示剂，BTB的弱碱性溶液颜色可随其中CO ₂浓度的增高而由蓝变绿再变黄．某同学为研究某种水草的光合作用和呼吸作用，进行了如下实验：用少量的NaHCO ₃和BTB加水配制成蓝色溶液，并向溶液中通入一定量的CO ₂使溶液变成浅绿色，之后将等量的绿色溶液分别加入到7支试管中，其中6支加入生长状况一致的等量水草，另一支不加水草，密闭所有试管．各试管的实验处理和结果见表．

试管编号	1	2	3	4	5	6	7
水草	无	有	有	有	有	有	有
距日光灯的距离（cm）	20	遮光*	100	80	60	40	20
50min后试管中溶液的颜色	浅绿色	X	浅黄色	黄绿色	浅绿色	浅蓝色	蓝色

*遮光是指用黑纸将试管包裹起来，并放在距日光灯100cm的地方．

若不考虑其他生物因素对实验结果的影响，回答下列问题：

（1）本实验中，50min后1号试管的溶液是浅绿色，则说明2至7号试管的实验结果是由________引起的；若1号试管的溶液是蓝色，则说明2至7号试管的实验结果________（填"可靠的"或"不可靠的"）．

（2）表中X代表的颜色应为________（填"浅绿色"、"黄色"或"蓝色"），判断依据是________．

（3）5号试管中的溶液颜色在照光前后没有变化，说明在此条件下水草________．

为了研究温度对某种酶活性的影响，设置三个实验组：A组（20℃）、B组（40℃）和C组（60℃），测定各组在不同反应时间内的产物浓度（其他条件相同），结果如图．回答下列问题：

（1）三个温度条件下，该酶活性最高的是________组．

（2）在时间t ₁之前，如果A组温度提高10℃，那么A组酶催化反应的速度会________．

（3）如果在时间t ₂时，向C组反应体系中增加2倍量的底物，其他条件保持不变，那么在t ₃时，C组产物总量________，原因是________．

（4）生物体内酶的化学本质是________，其特性有________（答出两点即可）．