科研人员构建了可表达J﹣V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，-优题课

科研人员构建了可表达 $J ﹣ V 5$ 融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中 $V 5$ 编码序列表达标签短肽V5。

（1）与图甲中启动子结合的酶是＿＿＿＿＿＿。除图甲中标出的结构外，作为载体，质粒还需具备的结构有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（答出2个结构即可）。

（2）构建重组质粒后，为了确定 $J$ 基因连接到质粒中且插入方向正确，需进行 $P C R$ 检测，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物＿＿＿＿＿＿。已知 $J$ 基因转录的模板链位于b链，由此可知引物 $F 1$ 与图甲中J基因的＿＿＿＿＿＿（填“a链”或“b链”）相应部分的序列相同。

（3）重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗 $J$ 蛋白抗体和抗 $V 5$ 抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。其中，出现条带 $1$ 证明细胞内表达了＿＿＿＿＿＿，条带 $2$ 所检出的蛋白＿＿＿＿＿＿（填“是”或“不是”）由重组质粒上的J基因表达的。

科目生物题型实验题难度较难

磁场刺激是一种调节神经系统生理状态的有效方法，为研究其对神经系统钝化的改善和电生理机制，以小鼠为动物模型进行如下实验。

（1）将小鼠随机分为3组：对照组、神经系统钝化模型（HU）组和磁场刺激（CFS）组，每组8只。其中CFS组应在______组处理的基础上，对小鼠进行适当的磁场刺激。

（2）检测上述3组小鼠的认知功能水平，结果如图1。理论上推测，______或______组可能为对照组。

（3）检测上述3组小鼠海马区神经元的兴奋性。

①检测静息电位，结果如图2。纵坐标数值为0的点应为______（从A-D中选择）。

②检测动作电位峰值，组间无差异。说明______组的______离子内流入神经元的数量最多。

以上实验说明，在细胞水平，CFS可改善神经系统钝化时出现的神经元______；在个体水平，CFS可改善神经系统钝化引起的认知功能下降。

基因工程：制备新型酵母菌

（1）已知酵母菌不能吸收淀粉，若想使新型酵母菌可以直接利用淀粉发酵，则应导入多步分解淀粉所需的多种酶，推测这些酶生效的场所应该是＿＿＿＿＿。（填“细胞内”和“细胞外”）

（2）同源切割是一种代替限制酶、 $D N A$ 连接酶将目的基因导入基因表达载体的方法。当目的基因两侧的小段序列与基因表达载体上某序列相同时，就可以发生同源切割，将目的基因直接插入。研究人员运用同源切割的方式，在目的基因两端加上一组同源序列 $A ﹣ B$ ，已知酵母菌体内 $D N A$ 有许多 $A ﹣ B$ 序列位点可以同源切割插入。构建完成的目的基因结构如图甲，则应选择图中的引物＿＿＿＿＿对目的基因进行 $P C R$ 。

（3）已知酵母菌不能合成尿嘧啶，因此尿嘧啶合成基因（ $U G A$ ）常用作标记基因，又知尿嘧啶可以使 $5 ﹣$ 氟乳清酸转化为对酵母菌有毒物质。

（i）导入目的基因的酵母菌应在＿＿＿＿＿的培养基上筛选培养。由于需要导入多种酶基因，需要多次筛选，因此在导入一种目的基因后，要切除 $U G A$ 基因，再重新导入。研究人员在 $U G A$ 基因序列两端加上酵母菌 $D N A$ 中不存在的同源 $C . C'$ 序列，以便对 $U G A$ 基因进行切除。 $C . C'$ 的序列方向将影响切割时同源序列的配对方式，进而决定 $D N A$ 片段在切割后是否可以顺利重连，如图乙，则应选择方式＿＿＿＿＿进行连接。

（ii）切去 $U G A$ 基因的酵母菌应在＿＿＿＿＿的培养基上筛选培养。

（4）综上，目的基因、标记基因和同源序列在导入酵母菌的基因表达载体上的排列方式应该如图丙中的图＿＿＿＿＿。

某植物四号染色体上面的 $A$ 基因可以指导植酸合成，不能合成植酸的该种植物会死亡。现有 $A^{3 ﹣}$ 和 $A 25^{﹣}$ 两种分别由 $A$ 基因缺失 $3$ 个和 $25$ 个碱基对产生的基因，已知前者不影响植酸合成，后者效果未知。

（1）现有基因型为 $A A^{25 ﹣}$ 的植物，这两个基因是＿＿＿＿＿基因。该植物自交后代进行 $P C R$ ，正向引物与 $A 25^{﹣}$ 缺失的碱基配对，反向引物在其下游 $0.5 k b$ 处， $P C R$ 后进行电泳，发现植物全部后代 $P C R$ 产物电泳结果均具有明亮条带，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，其中明亮条带分为较明亮和较暗两种，其中较明亮条带代表基因型为＿＿＿＿＿的植物，比例为＿＿＿＿＿。

（2）将一个 $A$ 基因导入基因型为 $A^{3 ﹣} A^{25 ﹣}$ 的植物的6号染色体，构成基因型为 $A^{3 ﹣} A^{25 ﹣} A$ 的植物、该植物自交子代中含有 $A^{25 ﹣} A^{25 ﹣}$ 的比例是＿＿＿＿＿。

（3）在某逆境中，基因型为 $A^{3 ﹣} A^{3 ﹣}$ 的植物生存具有优势，现有某基因型为 $A^{3 ﹣} A$ 的植物，若该种植物严格自交，且基因型为 $A^{3 ﹣} A^{3 ﹣}$ 的植物每代数量增加 $10 %$ ，补齐表格中，子一代基因频率数据（保留一位小数）：

代	亲代	子一代	子二代
A基因频率	50%	＿＿＿＿＿%	46.9%
A³^﹣基因频率	50%	＿＿＿＿＿%	53.1%

基因频率改变，是＿＿＿＿＿的结果。

研究人员探究植物根部生长素运输情况，得到了生长素运输方向示意图（图1）

（1）生长素从根尖分生区运输到伸长区的运输类型是＿＿＿＿＿。

（2）图2是正常植物和某蛋白N对应基因缺失型的植物根部大小对比及生长素分布对比，据此回答：

（i）N蛋白基因缺失，会导致根部变短，并导致生长素在根部＿＿＿＿＿处（填“表皮”或“中央”）运输受阻。

（ii）如图3，在正常植物细胞中， $P I N 2$ 蛋白是一种主要分布在植物顶膜的蛋白，推测其功能是将生长素从细胞＿＿＿＿＿运输到细胞＿＿＿＿＿，根据图3，N蛋白缺失型的植物细胞中， $P I N 2$ 蛋白分布特点为：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）根据上述研究，推测N蛋白的作用是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，从而促进了伸长区细胞伸长。

某种蜂将幼虫生产在某种寄主动物的身体里，研究人员发现幼虫羽化成功率与寄主肠道菌群有关，得到如下表结论：

菌种	1	2	3	4	5	6
醋酸杆菌A	+	﹣	+	+	+	+
芽孢杆菌B	+	﹣	﹣	+	﹣	﹣
菌C	+	﹣	﹣	﹣	+	﹣
菌D	+	﹣	﹣	﹣	﹣	+

注：+代表存在这种菌，﹣代表不存在这种菌

（1）根据第＿＿＿＿＿列，在有菌A的情况下，菌＿＿＿＿＿会进一步促进提高幼蜂羽化率。

（2）研究人员对幼蜂寄生可能造成的影响进行研究。

（i）研究发现幼蜂会分泌一种物质，类似于人体内胰岛素的作用，则其作用可以是促进＿＿＿＿＿物质转化为脂质。

（ii）研究还发现，幼蜂的存在会导致寄主体内脂肪酶活性降低，这是通过＿＿＿＿＿的方式使寄主积累脂质。

（iii）研究还需要知道幼蜂是否对寄主体内脂质合成量有影响，结合以上实验结果，请设计实验探究：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。