CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA(总DNA)的技术。CTAB能跟核酸形成复合物,在高盐溶液(>0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在,当降低溶液中盐的浓度(<0.3mol/L的 NaCl溶液),CTAB - 核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀,再用70% 酒精浸泡可洗脱掉CTAB;氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下:
①在50ml离心管中加入20mlCTAB抽提缓冲液(主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中预热;
②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中,用液氮速冻并研磨成粉末,加入上述离心管中,于65℃水浴中保温30min;
③取出离心管中,冷却至室温,加入20mL的氯仿,轻轻混匀20min;
④在室温下以 12000r/min的转速离心10-20 min;
⑤将上清液移入另一个离心管中,加入2/3体积的经冷却的异丙醇,用玻璃棒轻轻搅动,小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的复合物沉淀;
⑥将沉淀移入另一个离心管中,加入70%乙醇洗涤,重复洗涤1-2次;
⑦吹干乙醇后,将DNA溶于适量的TE缓冲液中,在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离并在
核酸紫外检测仪上观察。
请回答下列问题:
(1)植物基因组DNA(总DNA)的提取通常采用机械研磨的方法,常温下研磨时,
植物细胞匀浆含有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻,材料在研磨时易于破碎,同时还具有 的作用。
(2)实验步骤③、④的目的是 。
(3)实验步骤⑤中,玻璃棒上出现沉淀的主要原因是 。
(4)对DNA进行定性检测常用的试剂是 。琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及 、 ,使带电分子产生
而实现分离。DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,利用核酸紫外检测仪可以进行 。
图中的①代表磷酸集团,②代表五碳糖,③代表含氮碱基。请根据图回答下面的问题
(2)若③是胞嘧啶,当②是 时,该图代表核糖核苷酸;
(2)若③胸腺嘧啶,则②是 时,该图代表脱氧核糖核苷酸;
(3)若②是核糖,则③有 种;
(4)若该图所示的物质只存在于禽流感病毒中,则②一定是 ,而③可以
是 、 、 、 。(写碱基名称)
根据下列化合物的结构分析回答:
(1)该化合物中,①表示__________,⑥表示__________。该化合物有_______种氨基酸,造成这种不同的基团编号是_________________。
(2)该化合物是由____________个氨基酸失去____________分子水而形成的。
(3)水分子中的氧来自于__________,氢来自于___________。
下图表示细胞中四种有机物的组成及功能,请分析回答:
(1)A是_______,E在动物体内是指______,在植物体内主要指____。
(2)F是________,除此之外,脂质还包括_________和__________等。
(3)C是___________,通式是___________,C形成G的反应叫__________。
(4)细胞中的H是 。
成熟植物细胞吸收水的方式是 ,它的产生必须具备两个条件,就是 _________________________和 ___________________。
果蝇是遗传学常用的材料,回答下列有关遗传学问题。
(1)图1表示对雌果蝇眼型的遗传研究结果,由图分析,果蝇眼形由正常眼转变为棒眼是由于 导致的,其中雄性棒眼果蝇的基因型为 。
(2)研究人员构建了一个棒眼雌果蝇品系XdBXb,其细胞中的一条X染色体上携带隐性致死基因d,且该基因与棒眼基因B始终连在一起,如图2所示。在纯合(XdBXdB、XdBY)时能使胚胎致死。若棒眼雌果蝇(XdBXb)与野生正常眼雄果蝇(XbY)杂交,F1果蝇的表现型有三种,分别为棒眼雌果蝇、正常眼雄果蝇和 ,其中雄果蝇占 。若F1雌果蝇随机交配,则产生的F2中Xb频率为 。
(3)遗传学上将染色体上某一区段及其带有的基因一起丢失的现象叫缺失,若一对同源染色体中两条染色体在相同区域同时缺失叫缺失纯合子,若仅一条染色体发生缺失而另一条正常叫缺失杂合子。缺失杂合子的生活力降低但能存活,缺失纯合子导致个体胚胎期死亡。现有一红眼雄果蝇XAY与一白眼雌果蝇XaXa杂交,子代中出现一只白眼雌果蝇。请用杂交实验判断这只白眼雌果蝇的出现是由于缺失造成的,还是由于基因突变引起的?
实验设计:选该白眼雌果蝇与多只红眼雄果蝇杂交,观察统计子代中雌雄果蝇数量之比。
结果及结论:
①若子代中雌果蝇数与雄果蝇数比为 ,则为基因突变引起的。
②若子代中雌果蝇数与雄果蝇数比为 ,则是由于缺失造成的。