运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人的细胞与-优题课

通过基因工程技术克隆细胞膜上乙酰胆碱（一种神经递质）受体基因的操作过程如下图，请分析回答问题。

（1）获得上图中的mRNA最佳材料是__________细胞。
（2）完成过程①②必不可少的酶是__________。
（3）构建的基因表达载体上除了目的基因、标记基因外，还要有_________、__________。
（4）探针筛选的目的是_____________。

科学家发现家蝇幼虫体内有一种抗肿瘤蛋白，具有抗癌的奇特疗效。它能对肿瘤产生特异性的抑制，并能增强机体的免疫力。下图所示为通过基因工程技术生产这种蛋白质的方法，请回答下列问题：

(1)图中C过程是基因工程的核心步骤。此步骤的目的是_____ ______，
(2)把B导入大肠杆菌过程，用大肠杆菌作为受体细胞的优点是_____________________。
(3)经检测抗肿瘤基因已经成功导入受体细胞。为了检测目的基因是否转录，需要从受体细胞提取____________，用______________法检测；为了检测目的基因是否翻译，需要从受体细胞提取蛋白质，用___________法检测。

土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有Ti质粒。Ti质粒是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，其上只有T—DNA片段才能转入植物细胞的基因组。Ti质粒的结构及转化过程如图所示，请分析并回答：

（1）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即去除瘤基因，将抗旱基因转移至片段，然后在一定条件下将外植体在含土壤农杆菌的稀释培养基上培养，此时修饰的Ti质粒的相应片段可转入植物细胞并整合到植物基因组中。以上过程需要的工具酶有。
（2）将上述外植体置于一个含有的选择培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成后，通过产生不定芽再长出整个植物。
（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在个体水平对上述转基因植物与非转基因植物的性能进行比较。

人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入“雌性奶牛胚胎”的细胞中，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：
（1）重组细胞①和②中（①／②）实现了基因的重组。
（2）在实验过程a中要选择 “雌性奶牛胚胎”的原因是。
（3）实验过程b利用的技术是，胚胎工程操作中最后环节是。
（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型
（相同／不同），理由是。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，可以用处理内细胞团，使之分散成单个细胞。在饲养层上培养可维持细胞状态。
（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及等物质。

卡罗琳斯卡医学院2012年10月8日宣布，将2012年诺贝尔生理学或医学奖授予约翰格登和山中伸弥，以表彰他在“体细胞重编程技术”领域作出的革命性贡献。请回答下列问题：
（1）约翰格登于1962年通过实验把蝌蚪已分化体细胞的细胞核移植进入卵母细胞质中，并成功培育出“克隆青蛙”。由于动物细胞的全能性会随着动物细胞______程度的提高而逐渐受到限制，直到今天也还不能用类似______（某种植物细胞工程的技术手段）的方法获得完整的动物个体。“克隆青蛙”的培育成功，说明了。
（2）山中伸弥于2006年把4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞。在该技术中，逆转录病毒是这4个关键基因进入成纤维细胞的_______（基因工程的工具），它能够携带外源基因进入受体细胞，并整合到其染色体的DNA上。
（3）所谓“体细胞重编程技术”即将成年体细胞重新诱导同早期干细胞状态，即获得iPS细胞，iPS细胞与胚胎干细胞一样，具有发育的_______，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。