现有从某生物体内提取的一个DNA分子(称第一代DNA分子),还有经放射性同位素3H标记的四种脱氧核苷酸,要在实验室内合成新的DNA分子。
(1)除上述几种物质外,还必须有 和 方能合成第二代的DNA分子。
(2)在第二代的每个DNA分子中,有 条含3H的链。
(3)在第二代的所有DNA分子中,含有3H的链的碱基序列相同吗? 。
(4)在第五代的全部DNA分子中,其中有几个DNA分子不含3H? 。
下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1)技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)根据培养基的用途分类,图中培养基属于培养基。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是。
(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外,还可以采用。
(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的特点,又具备淋巴细胞的特点。
(6)淋巴细胞是由动物体中的细胞分化、发育而来。上图中的某些淋巴细胞是指。
(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是。
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有、个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SrnaⅠ切割,原因是。
(4)与只使用EcoRI相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图,据图回答:
(1)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,原因是 。
(2)表示的是采取的方法来获取目的基因。
(3)图中③过程用人工方法,使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴细菌或病毒细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用 处理,以增大的通透性,使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的,说明已导入了;
(5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌,放在含有四环素的培养基上培养,发生的现象是导入细菌能生长,导入的细菌不能生长。因为。
卡罗林斯卡医学院2012年10月8日宣布,将2012年诺贝尔生理学或医学奖授予约翰·格登和山中伸弥,以表彰他们在“体细胞重编程技术”领域做出的革命性贡献。请回答下列问题:
(1)约翰·格登于1962年通过实验把蝌蚪已分化体细胞的细胞核移植进入卵母细胞质中,并成功培育出“克隆青蛙”。由于动物细胞的全能性会随着动物细胞程度的提高而逐渐受到限制,分化潜能逐渐变弱,直到今天也还不能用类似(植物细胞工程的技术手段)的方法获得完整的动物个体。因此,约翰·格登培育“克隆青蛙”,实际是通过(动物细胞工程的技术手段)来实现的。
(2)山中伸弥于2006年把4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞,使其变成多功能干细胞。在该技术中,逆转录病毒是这4个关键基因进入成纤维细胞的(基因工程工具),它能够携带外源基因进入受体细胞,并整合到其染色体上。
(3)所谓“体细胞重编程技术”即将成年体细胞重新诱导回早期干细胞状态,即获得iPS细胞。iPS细胞与胚胎干细胞一样,具有发育的,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。
(4)目前获得iPS细胞的方法除上述两种之外,常见的还有以下两种:一是诱导成年体细胞与胚胎干细胞产生四倍体细胞;二是应用技术(动物细胞工程的技术手段)将生殖细胞置于特定条件下进行培养。
高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。
(1)进行①过程的目的是;②过程所使用的接种方法是法。
(2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于培养基,仅以淀粉作为源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入作为凝固剂。
(3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是;一般对配制的培养基采用法灭菌。
(4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈(大或小)的菌落,接种到Ⅱ号培养基。