目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示。
(1)构建人工质粒时要有抗性基因，以便于________。观察上图，如果A为质粒，则C表示 。
(2)pBR322分子中有单个EcoRⅠ限制酶作用位点，EcoRⅠ只能识别序列—GAATTC—，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
_______________________________________________________________________
(3)pBR322分子中另有单个的BamHⅠ限制酶作用位点，现将经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因，通过____________作用恢复________________________键，成功地获得了重组质粒。能形成重组质粒的原因是_______________________________________________________________________
(4) 作为受体大肠杆菌应不含_______________________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是_______，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是______________。
（5）基因工程中使用的限制酶，其特点是_______________________，下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有＿＿＿。（可多选）
| A．X－1 | B．X－2 | C．X－3 | D．X－4 |
内蒙古白绒山羊的血管内皮生长因子基因（VEGF164），若在皮肤毛囊细胞中特异性表达，可促进毛囊 发育和毛发生长，显著提高羊毛产量。科学家将该基因导入羊胎儿的成纤维细胞核，成功培育出转基因克隆山羊。技术流程如下图，其中EcoRⅠ、SalⅠ、SphⅠ为限制酶。
请据图回答。
⑴在构建基因表达载体的过程中，应采用______（填限制酶名称）对质粒和含绿色荧光基因的DNA片段进行酶切，再经相应处理形成重组质粒。其中绿色荧光基因的作用是______。
⑵要使VEGF164在皮肤毛囊中表达，须将它与羊绒蛋白基因的______等调控组件重组起来，构建基因表达载体。
⑶图中①将基因表达载体导入胎儿成纤维细胞核的方法是______。将导入成功的细胞核注入到去核的卵母细胞构成重组细胞，培养成早期胚胎，经图中②______技术可培育成转基因克隆山羊。
利用卵细胞培育二倍体是目前鱼类育种的重要技术。其原理是经辐射处理的精子入卵后不能与卵细胞核融合，只激活卵细胞分裂，后代的遗传物质全部来自卵细胞。关键步骤包括：①精子染色体的失活处理；②卵细胞染色体二倍体化；③后代染色体检测。请据图回答。
⑴辐射处理可导致精子染色体断裂失活，丧失受精能力，这属于______变异。
⑵卵细胞的二倍体化有两种方法。用方法一获得的子代是纯合二倍体，导致染色体数目加倍的原因是______；用方法二获得的子代通常是杂合二倍体，这是因为在四分体时期______发生了交叉互换造成的。
⑶用上述方法繁殖鱼类并统计子代性别比例，可判断其性别决定机制。若子代性别比例为______，则其性别决定为XY型；若子代性别比例为______（WW个体不能成活），则其性别决定为ZW型。
⑷已知金鱼的正常眼（A）对龙眼（a）为显性，基因B能抑制龙眼基因表达，两对基因分别位于两对常染色体上。偶然发现一只有观赏价值的龙眼雌鱼，若用卵细胞二倍体化的方法进行大量繁殖，子代出现龙眼个体的概率为______；若用基因型为AABB的雄鱼与该雌鱼杂交，子二代出现龙眼个体的概率为______。
1958年F．C．Steward利用植物组织培养技术将胡萝卜韧皮部细胞培育成新植株，他所配制的培养基中除含有必要的养料外，还加入了生长素等植物激素。请分析回答。
（1）物组织培养能够获得成功的理论基础是______。
⑵有学者认为，生长素（IAA）能与细胞膜上的受体结合，经一系列反应，产生图中所示的______等信息分子。信息分子进入细胞核，“唤醒”与细胞分裂有关的基因，使其转录形成______。转录产物进入细胞质后，指导蛋白质合成，使细胞恢复分裂能力。由此可见，生长素不是直接参与代谢，而是给细胞传达_____ _的信息。
⑶生长素还能促进细胞生长，这是因为生长素能活化细胞膜上的某种载体蛋白，将细胞内的H+以_______方式运输到细胞壁中，使细胞壁变得松弛，束缚力减弱，有利于细胞伸长。实验表明，少量的H+就可使幼嫩细胞的细胞壁变得松弛。因此，与老细胞相比，幼嫩细胞对生长素的反应更为______。
韭黄是利用绿色韭菜在避光条件下培养出来的。某同学利用所学知识研究韭黄叶片呈黄色的原因，其方法步骤如下：
步骤一提取叶片中的色素
1．分别称取5g韭菜叶片和韭黄叶片，剪碎，放入两个研钵中。
2．向两个研钵中各加入少许二氧化硅，再加入10ml无水乙醇，进行迅速、充分的研磨。
3．将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一块单层尼龙布)中进行过滤。将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。
步骤二制备滤纸条
将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条一端剪去两角，并在距此端1cm处用铅笔画一条细横线。
步骤三画滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画一细线，并迅速重复画一两次。
步骤四分离色素
将适量的层析液倒入试管，将滤纸条画线一端朝下，轻轻插入层析液中（注意：不能让滤液细线触及层析液），用棉塞塞紧试管口，进行层析。
步骤五观察、记录
待层析液上缘扩散至接近滤纸条顶端时，将滤纸条取出，风干。观察滤纸条上所出现的色素带及颜色，并记录结果。
请分析回答：
（1）上述实验操作中有2处错误，请改正。
①______；②______。
⑵该同学纠正错误后重做实验，结果如图所示，其中色素带颜色①和⑤相同、②和⑥相同。
由结果分析可知，韭黄叶片呈黄色的原因是：在避光条件下，韭黄不能合成______（填色素名称），叶片中只含有______（填色素名称）。
⑶图甲中的色素分布在叶绿体的______上，其吸收的光能有两方面用途：一是将水分解成______；二是用于合成______。
为了研究乙醇对人体神经行为能力的影响，科研人员选取若干自愿者，等量饮用同一种酒，参照世卫组织神经行为能力测试标准，测试短时间反应时（对简章信号作出反应的最短时间）、视觉保留（对视觉信号记忆的准确数）和血液中乙醇浓度。以受试者自身未饮酒时为对照，计算能力指数相对值，结果如图所示。请回答下列问题： 
（1）测试期间受试者血液中乙醇浓度的变化说明人体能通过调节维持＿＿＿＿＿＿。
（2）随着血液中乙醇浓度的迅速升高，神经行为能力指数相对值明显降低，可以推测乙醇会兴奋在相应反射弧上的传输时间，从而降低了机体的反应速度和判断能力。
（3）对视觉信号作出判断与反应需经过的神经中枢位于＿＿＿＿＿＿。
（4）动物实验显示，乙醇能增加脑组织中某种抑制性神经递质与相应受体的结合。由此推测乙醇可能影响了兴奋在＿＿＿＿＿＿处的传输。
（5）凡有神经系统疾患、视听觉及手部运动障碍都不能作为测试对象，原因是受试者的＿＿＿＿必须结构完整和功能正常；甲状腺功能亢进的患者也不宜作为受试者，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿从而干扰测试结果。