某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。
实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计
数板，试管，吸管等。
I．其中某位同学实验操作如下：（请将实验内容补充完整）
（1）取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用
处理，使其分散开来，置于培养皿中培养。
（2）取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5， 并在1-4号试管中加入 ，
5号试管中加入 。
（3）从培养皿中吸取等量的培养液置于1-5号试管中，振荡后，将试管放置在冰箱中培养一段时间。
（4）直接从静置的5支试管中吸取适量培养液置于血球计数板上，在显微镜下计数，记录数据。
请你纠正上面这位同学操作上在（3）和（4）步骤中存在的错误
； 
。
II．根据纠正后的正确方法进行实验，结果如下：
| 试管编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
| 二氯二乙胺浓度(mg/mL) |
0.1 |
0.2 |
0.3 |
0.4 |
0 |
| 步骤II记录的细胞数目（个/mL） |
350 |
363 |
342 |
335 |
336 |
| 步骤V记录的细胞数目（个/mL） |
320 |
275 |
186 |
96 |
560 |
A.在该实验中，遵循了实验设计的 
原则。
B.根据实验结果,你能得出的结论:
第一 ； 第二 
胚胎工程技术包含的内容很丰富，如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：
（1）应用1获得的小牛，其遗传物质来源于。
（2）应用2中用处理适龄良种母牛，可使其一次性排出比自然情况下多几倍到几十倍的卵子；若在卵黄膜和透明带之间观察到，则表明受精已完成。刚种植在子宫内的胚胎其发育程度一般为。这种试管牛的产生，采用的胚胎工程技术有。（至少答出2种）
（3）应用3中细胞C取自。
（4）应用4中通过技术获得二分胚①和②，得到的多个胚胎后植入代孕母牛体内。为保证胚胎移植的成功，胚胎的供体和受体应保持。同时，可以通过取样进行分子水平的早期胚胎性别鉴定。
下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答下列问题。
（1）先给小鼠注射HCG，一段时间后，若小鼠血清中检测的抗HCG的抗体，说明小鼠体内产生了反应，再从小鼠的中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的细胞融合，使用的不同于植物原生质体融合的方法是，该融合过程说明了细胞膜具有性。融合后的杂交瘤细胞既能，又能产生。
（2）将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取有克隆生长的细胞培养孔中的（填“上清液”或“沉淀细胞”），应用相关技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
（3）培养杂交瘤细胞时，若开始培养时取一滴培养液观察有100个细胞，经24h培养后，取一滴稀释100倍后再取一滴（设三次的“一滴”等量）观察，发现有64个细胞，则此细胞的细胞周期约为h。
请根据下图回答相关问题：
(1)①过程中使用了__________________酶，以使植物原生质体相互分离，此处使用的溶液浓度较大，保证植物细胞会发生________，以保护细胞原生质体不被破坏；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是__ ___。
(2)③处的细胞与④处的细胞相比，最大的区别是不具有____ ____；
(3)过程____和____属于再分化；动植物细胞发生分化的根本原因都是_______。
(4)③处的细胞在化学药剂________ __的作用下，会发生细胞融合。
(5)(多选)下列关于细胞工程的叙述中，错误的是
| A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 |
| B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 |
| C．⑥处的细胞都必须通过细胞分裂才能形成愈伤组织 |
| D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 |
E．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
萤火虫发光是体内荧光素酶催化一系列反应所产生的现象。如果荧光素酶存在于植物体内，也可使植物体发光。一直以来荧光素酶的惟一来源是从萤火虫腹部提取。但加利福尼亚大学的一组科学家成功地通过转基因工程实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内，并在大肠杆菌体内产生荧光素酶。请你根据已有的知识回答下列有关问题：
(1)在此转基因工程中，目的基因是________，具体操作过程中下图所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。
(2)在上述过程中需要多种酶的参与，其中包括限制性核酸内切酶和_____等。
(3)将此目的基因导入到大肠杆菌体内需要载体的帮助。下列_____(多选)是选取载体时必须考虑的。
A．能够在宿主细胞内复制并稳定保存 B．具有特定的限制酶切割位点
C．具有与目的基因相同的碱基片段 D．具有某些标记基因
(4)本实验中将目的基因导入大肠杆菌的载体可以是________(多选)。
A．质粒 B．动物病毒 C．噬菌体的衍生物 D．植物病毒
(5)在此转基因工程中，将体外重组DNA导入大肠杆菌体内，并使其在细胞内稳定保存和表达的过程称为转化。最常用的方法是首先用________处理大肠杆菌，目的是________________。
(6)转基因生物的DNA上是否插入目的基因，用________技术来检测；目的基因是否表达出相应的蛋白质，除了通过大肠杆菌是否发光来确定外，还可以通过________技术来判断。
（11分，每空1分）下图表示的是某类酶作用的模型和酶作用的曲线，根据图示回答下列问题：
（1）图一中代表酶的是_________ ，判断的依据是。
从1和2过程可以反映出酶具有________性，判断的依据是。除此以外，酶的特性还有。如果D代表蔗糖，那么E和F则是，A则是__________。
（2）从图二中可知，酶活性最高的是PH=_____
（3）从图二中可以看出：pH的变化__________(影响或不影响)酶作用的最适温度。
（4）pH=1时，反应物剩余量没有变化，原因是 __________
（5）图二实验研究的自变量是____________