下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达【5’AOX1和3’AOX1（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子】。
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上 、 限制酶识别序列， 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
（2）酶切获取HBsAg基因后，需用 将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取 。
（3）步骤3中应选用限制酶 来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用 方法进行检测。
（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入 以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行 并分泌到细胞外，便于提取。
下图甲、乙分别是两类高等生物细胞的亚显微结构模式图,请据图回答：
（1）图中所示结构只有通过才能观察到。
（2）图中可进行DNA复制的结构有(填序号)。
（3）如果将乙细胞放入蒸馏水中，则乙细胞的变化是____ __。
（4）甲图细胞中能产生ATP的细胞器是______ ___。 (填编号）
（5）如果甲图是根尖分生区细胞则不应该有的结构是。(填编号）
（6）在有光的条件下，14C标记的CO2进入甲细胞后，首先在[ ]中（细胞器）发生反应。该结构产生的含14C的最终产物主要在[ ]中彻底氧化分解成，为细胞生命活动提供能量。
（7）某同学设想把图示甲细胞与乙细胞（两者均为二倍体）杂交、首先要对甲细胞所作的处理是，如果融合成功，则杂种细胞是倍体。
（8）某同学想观察线粒体，能否选择甲细胞 ？，理由是。
斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上，带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g(G与g不存在显隐性关系)。用个体M和N进行如下杂交实验。
（1）1962年日本科学家下村修等人在水母中发现绿色荧光蛋白。它之所以能够发光,是因在其包含238个氨基酸的序列中，第65至67个氨基酸(丝氨酸—酪氨酸—甘氨酸)残基,可自发地形成一种荧光发色团。1992年，道格拉斯·普瑞舍克隆出完整编码238个氨基酸的绿色荧光蛋白基因。道格拉斯·普瑞舍获得绿色荧光蛋白基因的方法是。
（2）D基因与d基因的本质区别；绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上，定向改变了遗传物质，变异类型属于。
（3）在上述转基因实验中，将G基因与载体重组，需要的酶是和。将重组DNA分子显微注射到斑马鱼中，胚胎呈现出绿色荧光，那整合到染色体上的G基因完成了。
（4）根据上述杂交实验推测：
①亲代M的基因型是（填选项的符号）。
a．DDgg b．Ddgg
②子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括（填选项的符号）。
a．DDGG b．DDGg c．DdGGd．DdGg
某医院病理室为确诊一患者的肝组织肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题：
（1）培养之前，肿瘤组织需先用处理成单个细胞。
（2）化疗是抑制肿瘤组织增殖的一种方法，其原理是用药物抑制肿瘤细胞的，使细胞分裂停止在分裂间期。
（3）某科研单位研制出一种新型药物P，能有效抑制肝癌细胞的增殖，但不知道对造血干细胞的增殖是否有副作用。为验证其疗效并探究其副作用，请你利用以下材料和用具，完成实验步骤，并用柱状图的形式呈现实验结果。
材料和用具：已知起始数量的肝癌细胞和造血干细胞、动物细胞培养液、用生理盐水配置的药物P、生理盐水、培养瓶、CO2培养箱等。（要求与说明：提供的细胞均具有分裂能力，只进行原代培养且条件适宜，肝癌细胞与造血干细胞的具体计数方法不作要求。）
Ⅰ．实验步骤：①。
②。
③将上述细胞培养瓶放在（培养环境），在相同且适宜的条件下培养一段时间。
④一段时间后取出观察、并记录各组细胞的数目。
Ⅱ．若结果显示药物P只对肝癌细胞有效，请在坐标系中以柱状图的形式呈现该结果。
(12分)罗氏沼虾属于热带虾类，营养丰富，味道鲜美，个体大，生长快，易养殖，市场前景广阔，现已成为我国南方地区重点发展的特优水产品之一。沼虾是一种杂食性虾类，适宜生活在水质清新、溶氧量高，水温为24～30℃水体中。请回答：
（1）罗氏沼虾的日常管理较有学问，投饲多了虾吃不完影响水质，一些残余动物性饵料被微生物分解，导致水体富营养化、溶氧量降低，沼虾的数量减少。水温降到16℃时，罗氏沼虾行动迟缓，且不摄食，水温降到14℃以下时开始死亡。由此可见，沼虾的种群数量变动主要是由调节的。
（2）为控制水体污染，专家建议在养殖塘中人工引入植物浮床及沉水植物(如下图)。由图可见，养殖塘中鸢尾、苦草与轮叶黑藻形成群落（空间结构）的。它们通过与浮游藻类竞争阳光和N、P等无机盐，抑制藻类生长，改善水质，此简易工程属于的生态工程。
（3）输入该养殖塘的总能量(填大于、等于或小于)总初级生产量。为了维持水质洁净，持续获得高产，人工引入植物浮床及沉水植物时往往需要考虑植物的种类、数量及比例，这主要体现了生态工程的原理。
（4）近几年不少地方开展了稻田养殖，充分利用稻田良好的生态条件，获得稻、虾双丰收。这项农业生态工程的技术能按照生态和经济规律对产业进行综合优化，求得了生态效益和经济效益的最大化。
甲、乙两种化学物质可能有一定致畸、致癌作用，利用动物细胞培养的方法鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请依据实验结果完成下列实验报告。
I．实验步骤：
（1）制备细胞悬液：用处理小白鼠胚胎组织离散成单个细胞，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养：
① 取A．B．C三个洁净的锥形瓶，分别加入。
② 向A．B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀；
C瓶不作处理，作为对照。
③。（要求写出培养场所）。
（2）制作临时装片
（3）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于期的细胞，与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片进行对比，以确认发生变异的细胞。统计。
Ⅱ．实验结果：
| 培养瓶 |
A |
B |
C |
| 变异细胞占总细胞数 |
1.3% |
12.5% |
0.1% |
Ⅲ．请写出实验结论：。