白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一,应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵茵分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上,遇适宜条件开始萌发,生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮,通过芽管入侵虫体,在虫体内生长繁殖,消耗寄主体内养分,产生各种毒素,形成大量菌丝和孢子,布满虫体全身。请回答下面的问题:
(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→ ___________→性能测定。为分离鉴定白僵茵产生的各种酶,最为快捷灵敏的方法是___________。
(2)分离白僵菌菌种的培养基属于__________培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗 糖、硫酸铵、硝酸钾等成分,硫酸铵、硝酸钾属于________营养物质。
(3)白僵菌纯培养常用的接种方法是__________和___________。
(4)分离与培养过程中,培养基和接种工具都要进行 处理,利用高温可以使微生物的______等物质变性。
图1表示细胞生物遗传信息传递的某过程,图2表示DNA结构片段。请回答下列问题:
(1)图1所示的遗传信息传递过程是________,其中不同于图2的碱基互补配对方式是________。
(2)科学家在探究DNA复制特点时运用的主要技术是________。若把图2所示DNA放在含15N的培养液中复制3代,子代中含14N的DNA所占比例为________。在DNA复制过程中作用于b点的酶是________。
(3)若通过PCR技术共得到32个图2中的DNA片段则至少要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。
在研究生物遗传物质的过程中,人们做了很多的实验进行探究,包括著名的“肺炎双球菌转化实验”。某人曾重复了“肺炎双球菌转化实验”,步骤如下。请分析以下实验并回答问题:
A.将一部分S型细菌加热杀死;
B.制备符合要求的培养基,并分为若干组,将菌种分别接种到各组培养基上(接种的菌种见图中文字所示);
C.将接种后的培养皿放在适宜温度下培养一段时间,观察菌落生长情况(见图)。
(1)本实验中的对照组有:_______________________________________________。
(2)本实验得出的结论是:_______________________________________________。
(3)如图表示在格里菲思肺炎双球菌转化实验的基础上进行的实验部分图解,其目的是证明“转化因子”的化学成分。请据图回答:
①在对R型细菌进行培养之前,必须首先进行的工作是
________________________________________________________________________。
②依据上面实验的图解,可以作出________的假设。
③为验证上面的假设,又设计了下面的实验:
该实验中加DNA酶的目的是__________________________________________________,
观察到的实验现象是____________________________________________________。
④通过上面两步实验,仍然不能说明________________________________________,
为此还需设计下面的实验:
观察到的实验现象是____________________________________________________,
该实验能够说明___________________________________________________。
(4)由此可见,________是遗传物质,蛋白质等其他物质不是遗传物质。
回答下列与噬菌体侵染细菌实验有关的问题:
Ⅰ.1952年,赫尔希和蔡斯利用同位素标记完成了著名的噬菌体侵染细菌的实验,下面是实验的部分步骤:
(1)写出以上实验的部分操作步骤:
第一步:______________________________________________________________________。
第二步:______________________________________________________________________。
(2)以上实验结果说明:_____________________________________________________。
(3)若要大量制备用35S标记的噬菌体,需先用35S的培养基培养________,再用噬菌体去感染________________________________________________________________________。
Ⅱ.在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中,用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,在理论上,上清液中不含放射性,下层沉淀物中具有很高的放射性;而实验的实际最终结果显示:在离心上层液体中,也具有一定的放射性,而下层的放射性强度比理论值略低。
(1)在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中,采用的实验方法是___________________
________________________________________________________________。
(2)在理论上,上层液放射性应该为0,其原因是_________________________________。
(3)由于实验数据和理论数据之间有较大的误差,由此对实验过程进行误差分析:
a.在实验中,从噬菌体和大肠杆菌混合培养,到用离心机分离,这一段时间如果过长,会使上清液的放射性含量升高,其原因是__________________________________________。
b.在实验中,如果有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内,将________(填“是”或“不是”)误差的来源,理由是____________________________________________________。
(4)噬菌体侵染细菌实验证明了_____________________________________________。
(5)上述实验中,________(填“能”或“不能”)用15N来标记噬菌体的DNA,理由是________________________________________________________________________。
科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答:
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术必须用________酶,所需的原料是______________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点如表:
限制酶 |
BamHⅠ |
HindⅢ |
EcoRⅠ |
SmaⅠ |
识别序列 及切割位点 |
G↓GATCC CCTAGG↑ |
AA↓GCTT TTCGAA↑ |
GA↓ATTC CTTAAG↑ |
CCCG↓GG GGGC↑CC |
用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ酶切割,原因是______________________________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用____________________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是_____________________________________
___________________________________________________________________________________。
人工构建的大肠杆菌质粒pBR322是基因工程中应用最广泛的载体(见图1)。除标注外,图中其他英文缩写表示该质粒上不同的限制性核酸内切酶的切割位点。请分析回答问题:
(1)此质粒的化学本质是___________,它可以作为多种目的基因的(运)载体,原因是。ampr和tetr在基因工程中的主要作用是________________________________________________________________________。
(2)人胰岛素由两条肽链共有51个氨基酸组成,如图2所示。
①通过基因工程培育能合成人胰岛素的工程菌时,可先依据________推出________序列,再推出________序列,然后用化学方法人工合成A链和B链基因的片段。将此基因片段分别与________重组后,再导入大肠杆菌内。
②在大肠杆菌内合成的单独的A、B两条多肽链没有生物活性,是因为细菌中缺少________,不能________。若要直接获得有活性的转基因人胰岛素,可以选择________________作为受体细胞。