(7分)人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药-优题课

研究者为了研究神经元之间兴奋的传递过程，选用枪乌贼的神经组织进行实验，处理及结果见下表。

实验组号	处理	微电极刺激突触前神经元测得动作电位（mV）	室温，0.5ms后测得突触后神经元动作电位（mV）
I	未加河豚毒素（对照）	75	75
II	浸润在河豚毒素中	5min后	65	65
III	10min后	50	25
IV	15min后	40	0

（1）第I组处理说明枪乌贼神经元兴奋时，膜外比膜内电位__________75mV（填低或高）。室温下，微电极刺激突触前神经元测得动作电位0.5ms后，才能测到突触后神经元的动作电位，这被称为“兴奋的延迟”，延迟的原因之一是突触前膜以__________的方式释放__________，该物质被突触后膜上的__________识别。
（2）已知河豚毒素对于突触后膜识别信息分子的敏感性无影响，从II、III、IV组推断，突触后神经元动作电位的降低应该是____________________________直接引起的，由此可知河豚毒素对神经兴奋的传递起__________作用。
（3）若利用河豚毒素的生理作用开发药物，可作__________（选填选项前的符号，可多选）。
a．降糖药 b．麻醉药c．镇痛剂d．抗肌肉痉挛剂
（4）研究者利用水母荧光蛋白标记突触前神经元，直接观察到突触前膜先出现钙离子内流，之后引发突触小泡的定向移动。药物BAPTA能迅速结合钙离子，现将该药物注入突触小体内，若突触前神经元的____________________，则说明钙离子不影响突触前神经元产生神经冲动，但对于神经元之间兴奋的传递是必需的。

下图表示用农作物品种①和②两个品系培育出新品种⑥的可能方法，Ⅰ～Ⅴ表示培育过程，请回答：

（1）过程Ⅰ、Ⅴ培育出新品种⑥的育种方式是______________________。
（2）由品系④经过过程Ⅲ培育品种⑤常用的方法是______________。由品系⑤经过过程Ⅵ培育品种⑥常用______________处理，其作用的机理是。
（3）品种①和②经过过程Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ培育品种⑥的育种方法所应用的遗传学原理是_____________。

下图是基因控制蛋白质的合成过程示意图，请回答：

（1）图示中DNA转录时的模板链是________（填字母），对应的碱基序列为_______________________。
（2）图示中信使RNA片段共有______个密码子组成。
（3）图示中细胞核内发生的过程叫_________，核糖体上发生的过程叫________。

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度为。
（2）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有种不同DNA片段。
（3）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是。

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下图：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。
（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即　　　　　DNA连接酶和　　　　　　　DNA连接酶。
（3）基因工程中除质粒外，　　　　　和　　　　　　也可作为运载体。
（4）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，应先用处理大肠杆菌。