转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。下图一是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程。请据图回答：
（1）基因工程的核心步骤是______（填字母）。此过程所需的工具酶是
（2）下图二是运载体和反转录得到的胰岛素基因的片段，已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC－，
限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。GeneI和 GeneII为质粒上的标记基因，根据图分析, 应用限制
酶 切割质粒，用限制酶 切割目的基因。构建的重组质粒中,除含有外源基因、标记基
因外,还必须含有 和 。
（3）B过程中，常用_________处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入。
（4）如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用 方法。
下图表示某种植物的非绿色器官在不同的氧浓度下O2吸收量和CO2生成量的变化，请据图回答：
(1)图中曲线QR区段CO2生成量急剧减少的主要原因是。
(2)__ __点的生物学含义是厌氧呼吸消失点，此时O2吸收量 ____(＞、＜、＝)CO2的释放量。
(3)若图中的AB段与BC段的距离等长，说明此时需氧呼吸释放的CO2与厌氧呼吸释放的CO2相比____(填“一样多”或“更多”或“更少”)，需氧呼吸消耗的葡萄糖量是厌氧呼吸的_______倍。
下图一表示某种膜结构以及物质进出膜方式，图二表示某细胞在进行分泌蛋白的合成和分泌前几种生物膜的面积。请据图回答：
（1）图一中大写字母分别表示： BC。
（2）若图一为红细胞膜，则图中箭头[ ]表示钾离子的吸收过程。
（3）在图二中画出细胞在进行分泌蛋白的合成和分泌后这几种生物膜面积变化。
（4）在合成旺盛的细胞内，与内质网膜直接相连的生物膜有_________________（。
如图是培育的长春冬小麦（品种“吉株”）在不同时期的含水量、自由水量、结合水量和呼吸速率随时间的变化情况。
（1）在9～12月间，随着气温的不断下降，结合水的含量相对，由于结合水与亲水性物质结合而不易结冰，所以结合水含量的相对增加有利于增强冬小麦的抗性。
（2）大约从10月9日开始，冬小麦的呼吸，植物细胞消耗的糖分少，有利于糖分积累，这样就提高了浓度，使冰点。
（3）在9～12月间，自由水与含水量的比值不断，新陈代谢不断。
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
（1）Klenow酶是一种_______酶，合成的双链DNA有_______个碱基。
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它有_________________________的优点。
②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是___________________________。
③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_______________。
（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_______________。
花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图：
据图回答下列问题：
（1）过程①所需要的酶是，过程②体现了生物膜的特点。
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是。原生质体经过再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，通过、漂洗、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较。