Ⅰ.微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题:
(1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自__________________的土壤。
(2)为筛选和纯化该类微生物,从功能上分,应选用____培养基,此培养基中添加________作为微生物生长的唯一碳源。培养基灭菌采用的最适方法是________法。常用的接种方法是____________和__________________。
(3)接种后需密封培养,由此推测该类微生物的代谢类型是__________,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取________________就可获得高效菌株。
Ⅱ.我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养,最终发育成完整的新植株。下图是细胞培养形成兰花植株示意图,请据图回答:
(1)图示兰花培养的技术称为____________________,原理是____________________。图中③和④分别表示______________和________________过程。
(2)在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入________________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______(高/低)时,有利于根的分化。
(3)在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证__________________。
科学家从某些能无限增殖的细胞质中分离出无限增殖的调控基因(PrG),该基因能激发许多动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下列问题。
(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体,促进动物细胞融合常用的诱导因素是________。
(2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选,第一次筛选的目的是
_________________,第二次筛选的目的是_______________________。
(3)有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如下图所示。请回答问题。
①酶A是指________,酶B是指________。
②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是________;题目中Ⅱ所指的细胞是________,Ⅲ所指的细胞具有的特点是_____________________________。
③胚胎干细胞在体外培养的条件下可以增殖而不发生________,但通过体外定向诱导,能培育出人造____________________。
(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,试用相关的图示及文字表示该过程。
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答问题。
(1)制备单克隆抗体过程中要用到________和________技术。
(2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于________,使小鼠产生分泌相应________的淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的________免疫。
(3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径,主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。
①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。
②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________________________________。
(4)此过程生产的单克隆抗体可以与________特异性结合,从而诊断早孕。
据下面植物体细胞杂交技术流程图回答相关问题:
(1)若运用传统有性杂交(即用番茄、马铃薯杂交)能否得到杂种植株?为什么?
___________________________________________________。
(2)在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中,运用的技术手段是________,依据的原理是__________________________,其中过程②称为_____________技术,与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为________,过程④相当于________,⑤过程涉及的分裂方式为__________________________。
(3)已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体,则“番茄—马铃薯”属于________倍体植株。
(4)随“神六”太空旅行的种苗中,最受关注的是柴油树试管苗。柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物,可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产。若利用此技术,将柴油树细胞培养进行到过程________(填字母编号)即可。
科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性,从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞增殖的新途径。
方法思路:
①构建干扰质粒________(插入针对人体端粒酶逆转录亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列)和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何DNA序列的对照相序列)。
②用空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的________。计算细胞凋亡率,绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图:
请回答下列问题。
(1)完成实验步骤中的空格:
①________________;③__________________________。
(2)在构建质粒时,要将质粒导入大肠杆菌细胞并用________培养基进行筛选鉴定,然后再提取。因此,在构建的表达载体质粒上必须含有________。
(3)端粒酶可以通过以自身的________为模板,________为原料来合成端粒DNA。
(4)分析DNA载体途径的RNA干扰技术能否抑制肿瘤细胞?
________________________________________________________________
家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药。
(1)进行转基因操作前,需用________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。
(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、________和________。
(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以____________________,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。