浙江大学农学院喻景权教授的课题组最新研究发现一种植物激素——油菜素内酯,能促进农药在植物体内的降解和代谢。研究人员发现,用油菜素内酯处理后,许多参与农药降解的基因(如P450和GST)的表达和酶活性都得到提高,在这些基因的“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒无毒物质,有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作,请回答:
(1)获得油菜素内酯基因的方法有____________________、________________。第①步用PCR技术扩增基因时用到的耐高温的酶通常是指____________________。步骤②用到的酶有__________________________________________________。
(2)图中导入重组质粒的方法是______ __。在导入之前应用__________ __处理。
(3)导入重组质粒以后,往往还需要进行检测和筛选,可用______ __制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入________可将含有目的基因的细胞筛选出来。
(4)请你为该课题命名:_______________________________________________________
(5)请你说说该研究发现的生态学意义。
________________________________________________________________________
下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径,请据图回答有关问题:
(1)选用的材料合适与否是能否成功诱导出花粉植株的重要因素,一般来说选用________期的花粉可提高成功率。选择花粉时,一般要通过________来确定花粉是否处于合适的发育期,这时需要对花粉的细胞核进行染色,常用的染色剂是________。
(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中________。
(3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则,是一种高度________的薄壁细胞,胚状体与________发育形成的胚有类似的结构,即具有胚芽、胚轴和胚根。
(4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素,请说明下列各项需要消毒,还是需要灭菌。①培养基,②培养皿,③接种环,④花蕾,⑤实验操作者的双手,⑥三角锥形瓶。________(填编号)需要灭菌,________(填编号)需要消毒。
(5)试管苗移栽到土壤前,通常要进行壮苗处理,应如何壮苗?
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阅读如下材料:
材料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
材料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造,使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。
材料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题:
(1)材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法。构建基因表达载体常用的工具酶有。在培育转基因植物是,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是。
(2)材料乙属于工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对进行改造,或制造制造一种的技术。在该实例中,引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的序列发生了改变。
(3)材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中,兔甲称为体,兔乙称为体。
红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细
胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图
(1)EPO在人体细胞内合成的场所是____________。
(2)图中①所指的是____________技术,用该技术扩增与生物体内扩增所需酶的差异是______________________。
(3)图中的②与人体红细胞中提取的②是否相同?(填是或否)原因是____________。
(4)将含人EPO基因的表达载体导入受体细胞的方法是___________。用DNA分子杂交技术检测表达载体导入是否成功,基于的原理是_ ___。
(5)用凝胶色谱法初步分离纯化rhEPO,主要基于各种蛋白质_____________的差异。
下图一是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。
(1)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程并说明理由。______________________________。
(2)③过程断开的化学键名称为_____________,在体外PCR操作时实现该过程的处理方法为______________。
(3)若A中共有a个碱基对,其中腺嘌呤有b个,则③④⑤过程进行3次,至少需要提供鸟嘌呤脱氧核苷酸________个;利用PCR进行扩增时,除了4种脱氧核苷酸原料,还需加入________________________。
(4)为使过程⑧更易进行,可用_____________(试剂)处理大肠杆菌;为检测⑧过程是否成功,可将处理后的大肠杆菌置于_________________培养基上培养。
(5)将基因导入大肠杆菌获得的胰岛素还需进一步加工才具有活性,据此请你设计更好的方法制备胰岛素。(只需思路,不用具体步骤)_______________________________________。
毛角蛋白II型中间丝(KIFII)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)过程①中最常用的运载工具是__________,所需要的酶是限制酶和_____________。
(2)在过程②中,用__________处理将皮肤组织块分散成单个细胞。在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是________________。
(3)在过程③中,用______处理以获得更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行____处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是。在胚胎移植前,通过____________技术可获得较多胚胎。