下图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分-优题课

（9）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是。
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和植株的根尖，通过、、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较。
（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1—4 中一定不是杂种植株的有。

（6）对杂种植株进行接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

下图1为某生物体内细胞模式图的一部分，图2a～h为细胞器或细胞的某一结构。图2中各结构放大比例不同。请据图回答有关问题：

（1）图2所示的a～h中具有双层膜的结构是（用字母表达）；控制物质进出的细胞结构是[ 　]，研究表明，结构h的功能越复杂，其上的种类和数量就越多。
（2）若图1是胰腺腺泡细胞，其分泌物合成分泌过程是需要图2中的_________（用字母表达）参与，分泌过程中体现出h的结构特点是________________。
（3）若图1是根尖细胞，则没有图2中的d和[ ]__________。将细胞培养成个体，可运用________________的技术实现。
（4）科学家用差速离心法能够分离各种细胞结构。分离动物细胞结构时必须首先破坏细胞膜，破坏细胞膜最简便的方法是。

(10分)肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术的基本流程如下图甲所示。

请回答：
(1)进行过程①时，需用　　　　酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为　。
(2)进行过程②时，需用　　　　酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图乙所示。据图分析，可从细胞中提取　　　　　　　进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是细胞中　　　　　　(选填 “RAS mRNA”或“RAS蛋白”)含量减少引起的。

（共14分，每空2分）某生物兴趣小组的同学利用多套如下实验装置对酵母菌无氧呼吸需要的最适温度进行了相关探究，实验结果如右图，请分析实验信息并回答以下问题：

（1）本实验过程中的化学反应结果会改变实验的自变量，是因为被分解的葡萄糖中的能量一部分，其余转移至ATP中及存留在酒精中。
（2）试管中加水的主要目的是。
（3）葡萄糖溶液煮沸的目的是。
（4）欲检测无氧呼吸产物有无酒精，可用溶液进行鉴定，其溶液颜色变化是。
（5）如不考虑（1）中的不足，该实验（选填“能够”或者“不能”）达到实验目的，请提供改进方法。

（共14分，每空2分）（1）葫芦科中一种被称为喷瓜的植物，又称“铁炮瓜”，其性别类型由a^D、a⁺、a^d三种基因决定，三种基因关系如图1所示，其性别类型与基因型关系如表2所示，请根据有关信息回答下列问题。

①由图1可知基因突变具有的特点。
②由表2信息可知，自然界中没有雄性纯合植株的原因是。
③某雄性植株与雌性植株杂交，后代中雄性植株：两性植株=1:1，则亲代雄性植株的基因型为。
④喷瓜果皮深色（B）对浅色（b）为显性，若将雌雄同株的四倍体浅色喷瓜和雌雄同株的纯合二倍体深色喷瓜间行种植，收获四倍体植株上所结的种子。
a．二倍体喷瓜和四倍体喷瓜（填“有”或“无”）生殖隔离。
b．从细胞染色体组的角度预测：这些四倍体植株上结的种子播种后发育成的植株会有种类型。
c．这些植株发育成熟后，从其上结的果实的果皮颜色可以判断这些植株的类型。（提示：果皮由母本的组织直接发育而来；对于自然不能结果的，可人为处理。）如果所结果皮为色，则该植株为三倍体；如果所结果皮为色，则该植株为四倍体。