为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，一般可进行如下步骤筛选：
第一步：将大肠杆菌在含 的培养基上培养，得到如图1的菌落。
第二步：再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含 的培养基上培养，得到如图2的结果（空圈表示与图1对照无菌落的位置）。
第三步：选出图1培养皿中的某些菌落进行培养，即可得到含重组质粒的大肠杆菌。请在图1中圈出含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落
下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答问题：
(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是__________________。
(2)图甲中②过程常用的诱导因素有______________________________等（至少回答三项）。
(3)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗? _____________。原因是_______________________________________________。
（4）在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为哪个是最主要原因 （）
| A．卵细胞大，便于操作 | B．卵细胞含有的营养物质多 |
| C．卵细胞的细胞质可使体细胞胞核全能性得到表达 | D．重组细胞才具有全能性 |
（5）图甲中有两次筛选过程，第一次可以筛选出，第二次可筛选出。
（6）单克隆抗体最主要的优点在于___________________________________________。
（7）静脉注入而不是口服单克隆抗体的原因是。
下图表示胚胎移植的基本程序、早期胚胎发育过程。请回答下列问题：
(1)请在图中空格处将内容补充完整：①，②。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射。
(3)冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的冲洗出来。
(4)如果胚胎发育到了F期，这时的细胞就是胚胎干细胞。
（5）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其________。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和________。
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答： 
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 ______________，对 ____________________进行切割。
（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有，作为标记基因。
（3）香蕉组织细胞具有，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 ____。
日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图。据图回答：
(1)图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：__________________________________________________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是______________________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)________________________。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白
（5）若要在体外扩增绿色荧光蛋白基因可采用PCR技术。标准的PCR过程分为三个步骤，第一步是“变性”,这一步骤如果发生在细胞内，是在的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到酶。
(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________________等。(至少答出三项)
下图是处于平衡状态的简单淡水生态系统，请回答：
(1) 此生态系统中共有条食物链。
(2) 此生态系统中属于第五营养级的动物是。
(3)此生态系统中的分解者是
| A．水鸟 | B．水绵 | C．水藻 | D．腐生细菌、真菌 |
(4) 若所有水鸟迁徙到别处则大鱼数目，淡水虾数目。