下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答:
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。
A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR
(3)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。
(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________(填字母代号)技术。
A.核酸分子杂交 B.基因序列分析
C.抗原—抗体杂交 D.PCR
(每空2分,共8分)根据某家庭遗传病的系谱回答(其等位基因用A、a表示)
(1)该病属于常染色体性遗传病。
(2)Ⅰ1、Ⅱ5的基因型分别为、。
(3)若Ⅱ5与Ⅱ6(纯合子)婚配,其子女患病概率为。
(每空2分,共10分)下图为DNA分子结构的模式图,据图作答:
(1)依次写出1-4的碱基____。(用字母表示)
(2)图中5表示一个____分子。6表示一个____。
(3)碱基通过_______________连接成碱基对。
(4)若该DNA分子中,其中的一条链的A+G/T+C为0.4,那么在它的互补链中,A+G/T+C应为_________。
下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。请据图回答:
(1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的序列,再通过化学方法合成所需基因。
(2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加的有机物质有、、4种脱氧核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。
(3)由A和载体B拼接形成的C通常称为。
(4)在基因工程中,常用Ca2+处理D,其目的是。
(10分)科学家从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1禽流感病毒,用以生产可以预防和治疗禽流感的抗体,下图为单克隆抗体制备过程示意图,图中A~F分别表示生物技术或细胞名称,请回答有关问题:
(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自的细胞,C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是。
(2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可能形成3种类型的D细胞,因此需用培养基筛选出(填特点)的E细胞用于培养。
(3)将筛选出的E细胞注射到小鼠的内增殖,即可从小鼠的中提取出大量的单克隆抗体。(每空2分)
(4)在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O2和CO2,通入CO2的目的是。随着细胞分裂次数的增多,就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的,需要用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上分离下来。
结合配子的发生及受精作用,回答下列问题:
(1)精子细胞经变形后,发育形成精子的顶体,顶体内含有的顶体酶能协助精子依次穿过卵子的和。
(2)某动物排卵时,减数第一次分裂尚未完成,此时卵子处于卵母细胞阶段,当该细胞发育至时,才具备受精能力。若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体,则表明过程已完成。
(3)精子与卵子在相遇,当精子触及卵细胞膜的瞬间,会产生阻止后来精子进入透明带的生理反应,称为。精子头部进入卵细胞膜后,立即发生,阻止多精入卵。当,受精过程至此结束。