甲、注意，此题仅3、4、5、6、7、8班做
大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中，如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。请分析并回答问题。
(1)对已获得的目的基因可利用________技术进行扩增。
(2)目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中，需要DNA连接酶恢复________键。
(3)将试管Ⅰ中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是________；大肠杆菌需事先用Ca2＋进行处理，目的是________________。
(4)将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上，培养基中加入氨苄青霉素的作用是筛选出________。
(5)若观察到培养基上出现________色菌落，则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因，则不利于重组质粒的筛选，原因是________________
Ⅰ影响绿色植物光合作用的因素是多方面的，其外界因素有光照强度、CO2含量、温度等，其内部因素有酶的活性、色素的数量、五碳化合物的含量等，请据下图分析：
⑴如果x代表光照强度，光照强度影响光合作用强度，主要是影响阶段，当光合作用强度达到最大值时，此时限制因素最可能是内部因素中的。
（2）如果x代表CO2的含量，当光合作用强度达到最大值时，此时限制因素最可能是内部因素中的。
⑶如果将该植物置于一个白天温度为25℃,光照为8千勒克斯，夜间温度为15℃的环境中，一昼夜光照6小时，该植物会生长吗？。请说明理由 。 。
⑷如果在阴雨天气，温室内光照强度小于5千勒克斯，采取什么措施可以有助于提高光合产量：。请利用右上图阐明其原因：。
Ⅱ大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。
下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题：
（1）作为受体大肠杆菌应__________________________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理（增加其细胞壁的通透性）过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入。
（2）图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营
养物质外，还应加入____________________等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
（3）将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①。
②。
东北网2005年11月10日电：韩国食品药品安全厅确认在一些国产泡菜中发现寄生虫卵后，国内的泡菜企业非常紧张。有问题的泡菜企业的产品在各大商场纷纷下架，对外销售基本已经中断。
泡菜制作流程：选料→清洗→切块→盐渍→漂洗→腌制→分装→封罐、灭菌。
（1）泡菜在发酵期间，起主要作用的微生物是，发酵产物主要是。
（2）根据微生物的活动情况和发酵产物积累量，可以将泡菜发酵过程分为三个阶段。发酵初期指蔬菜刚入坛时，此时较为活跃的微生物是，发酵过程中有较多气泡产生，气泡中的气体主要是。发酵中期坛内缺氧状态形成，开始活跃。发酵后期由于发酵产物的大量积累，微生物的活动受到抑制。
（4）下表是不同食盐浓度的泡菜中的亚硝酸盐含量与发酵天数的关系图：
从上表可以看出影响泡菜中亚硝酸盐含量的因素包括食盐浓度和发酵天数，通过分析上表你能得出什么结论？
①泡菜在发酵初期，其亚硝酸盐含量，在发酵到时，其亚硝酸盐含量会达到一个最高值。
②不同的会影响泡菜中的亚硝酸盐含量，过高或过低的对泡菜中的亚硝酸盐含量都有不同程度的影响。
③泡菜要在发酵时间达到以后食用才比较适宜。
从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从环境采集，培养厌氧菌的菌样应从采集。
（2）富集培养指创设仅适应于该条件的微生物旺盛生长的特定的环境条件，使待分离微生物在群落中的数量大大增加，从而达到从自然界中分离到所需的特定微生物目的的微生物培养方法。对噬盐菌富集培养的培养基应是培养基；对高温淀粉酶的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。
（3）实验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高温使微生物的等物质发生。灭菌法是微生物研究和教学中应用最广、效果最好的湿热灭菌法。
 |
（4）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。
获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。
右图是某同学利用葡萄酿制葡萄酒和果醋的实验装置示意图。
该同学设计的实验流程如下：
采摘新鲜葡萄→冲洗葡萄，去除梗枝→发酵瓶消毒，葡萄榨汁、过滤→葡萄汁装入发酵瓶→发酵酿造葡萄酒→发酵酿造果醋
请结合实验装置示意图和实验流程回答下面的问题：
（1）该同学把葡萄汁装入发酵瓶后没有向发酵瓶接种酵母菌，但是他仍然通过发酵获得了葡萄酒。为什么？。
（2）该同学所设计的实验装置中充气口的作用是，排气口的作用是，排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接有什么作用？。
（3）葡萄汁装入时留出1/3空间的目的是。
（4）葡萄汁为酵母菌生长繁殖提供的营养有。
（5）使用该装置制酒时，应该充气口；制醋时，应将充气口。
（6）有人说：“做酒坛坛好，做醋坛坛酸。做酒坛坛好做醋，坛坛酸。” 说明了做酒和做醋的辨证关系。这两句话文字意思完全不同。虽然意思完全不同，但两句话的意思都是对的。你怎样理解“做酒坛坛好做醋，坛坛酸。”？
依据基因工程技术和细胞工程有关原理回答下列问题：
（1）基因工程操作的基本步骤是：
a ；
b ；
c ；
d 。
（2）获取目的基因途径有 、 。
（3）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。简述重组质粒的主要过程包括：
①；
②；
③。
④导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么？。