受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶(PPO)和底物(酚类物质)直接接触,引起马铃薯的褐变,为探究温度对PPO活性的影响,实验小组进行如下实验:
(1)PPO粗提液的提取
低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取20g样品放入含50mL磷酸缓冲液(PH值为5.5)的研钵中,同时加入少量石英砂,研磨、离心、上清液即为PPO的粗提液,加缓冲液研磨的目的是
(2)不同温度下PPO活性的测定
| 步骤顺序 |
试管1 |
试管2 |
试管3 |
试管4 |
试管5 |
试管61 |
试管7 |
试管8 |
| PPO粗提液 |
2mL |
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2mL |
|
2mL |
|
2mL |
|
| 酚类底物 |
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2mL |
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2mL |
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2mL |
|
2mL |
| 反应 |
混合振荡 |
混合振荡 |
混合振荡 |
混合振荡 |
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| 温度预处理(5min) |
0℃ |
15℃ |
30℃ |
45℃ |
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| 保温时间 |
5min |
5min |
5min |
5min |
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| 记录结果 |
+ |
++++ |
++++ |
++ |
(注:反应底物充足;实验结果中“+”越多褐色越深)
①实验步骤顺序有不妥之处,请改正 。
②实验结果表明:15℃和30℃温度条件,PPO具有相同的活性,从酶的特性分析其原因是 。
③为进一步探究PPO最适温度,应在 范围内设置温度梯度。
花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如图。
据图回答下列问题:
(1)过程①所需的酶是。
(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是。原生质体经过再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和植株的根尖,通过、、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。如图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR 扩增的结果。据图判断,再生植株1~4中一定是杂种植株的有。
(6)对杂种植株进行接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。
甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题:
(1)为了培育该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用酶和酶去除细胞壁,获得具有活力的,再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成组织,然后经过形成完整的杂种植株。这种培育技术称为。
(2)上述杂种植株属于多倍体,多倍体是指。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是
。
(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖,经植物组织培养得到的等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
如图所示是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解,请据图回答下列问题。
(1)图中①、②所示的结构分别是、。
(2)图中③、④所示的生物工程技术分别是、,此外图示过程还应用的工程技术有(只需写一种)。
(3)过程③通常用去核卵细胞做受体细胞的原因除了它体积大、易操作外,还因为
。
(4)过程④通常用②做受体细胞的原因是这些细胞没有分化,具有,可以定向诱导分化成各类细胞、组织和器官。
(5)过程④的完成需要用到的基因操作工具有。
(6)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是。
某实验室做了下图所示的实验研究,请据图回答:
(1)与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较。
(2)过程②是诱导干细胞中基因的结果。
(3)过程③需要用性培养基进行筛选,得到的Z细胞还需进行培养和,经多次筛选,就可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)科学家找到一种“无限增殖调控基因”能激发细胞不断分裂,通过基因工程技术将该基因导入待定的细胞(填细胞名称),来制备单克隆抗体,基因导入并成功表达后,受体细胞将具有的特点,在上述操作中用到了PCR扩增仪,其作用是。
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图:
请回答:
(1)过程①代表的是。
(2)过程②构建A基因表达载体时,必须使用和两种工具酶。
(3)过程③采用的实验技术是,获得的X是。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行比较;或用图中的进行特异性结合检测。