降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过16个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。
在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
（1）Klenow酶是一种 酶，合成的双链DNA有 个碱基对。
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点—G↓AATTC—）和BamHⅠ（识别序列和切割位点—G↓GATCC—）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它 。该细胞最常用的转化方法是用 处理细胞，使之处于能吸收周围的DNA的生理状态，这种细胞称为 。
②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是 。
（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是 。
（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是 。
下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程，请据图回答：
（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_____________。
（2）冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的_________________冲洗出来。
（3）从A到E中，适宜于胚胎移植时期有___________ （用字母表示）。
（4）图中标号3为______________，它将来可发育为胎膜和胚盘。
（5）配种后，受精过程正确的顺序为
①透明带反应②卵黄膜封闭作用③雌、雄原核融合④顶体反应
（6）该技术优势是
（7）若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗?为什么？
科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：
（1）生产单克隆抗体一般不直接培养B淋巴细胞，主要原因是。
（2）将注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞能产生抗该抗原的抗体。
（3）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞核骨髓瘤细胞，是因为它们融合的杂交瘤细胞具有的特性。
（4）单克隆抗体制备过程运用了和的细胞工程技术手段。
（5）动物细胞培养的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、
维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有。
（6）在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用
处理组织细胞使之分散开。
（7）鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较，具有的特点。
（8）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠-人嵌合抗体，属于(生物工程)的范畴，图示过程是根据预期的设计最终必须对进行操作。
2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
(1)④过程应用的主要生物技术是__________________________
__________________。
(2)②过程中将含杀虫基因的重组质粒导入土壤农杆菌常用的方法是
（3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(显示部分基因及部分限制性内切酶作用位点)，据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入__________________________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的(基因)，保证T－DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅱ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是：。
(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是。
知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研
制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
(1)实验步骤①所代表的反应过程是。
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用__________________________。
(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能________，也不能______________。
(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征，可用________与________进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是____________________________________。
生物柴油是一种可再生清洁能源，其应用在一定程度上能够缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
⑴用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用、方法从油料作物中提取。
⑵筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供，培养基灭菌采用的最适方法是
⑶测定培养液中微生物数量，可选用法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测，以确定其应用价值；为降低生产成本，可利用技术使脂肪酶能够重复使用。
⑷若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的技术。