海洋中的发光细菌具独特的生理特性，可作为环境监测的指标生物。
I.（1）使用 法（答二种），可在固体培养基上获得单菌落，纯化发光菌株。
（2）细菌这类微生物在基因工程中有重要应用，试列举其中一项。
II．现利用发光细菌对海水重金属污染程度进行生物毒性监测，请完善下列实验设计并回答问题：
实验原理：细菌代谢正常时，发光强度稳定；当重金属影响到其代谢时，发光会受到抑制，抑制程度用抑光率（发光被抑制的百分率）表示。
实验材料：发光菌悬液、可能受重金属污染的待测海水水样、3%NaCl溶液、荧光分光光度计（用于测定细菌发光强度）、试管等。
（1）实验步骤：按下表配制待测海水样品稀释液。
| 组 别 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
| 3%NaCl溶（mL） |
|
4.74 |
4.49 |
4.24 |
3.99 |
| 海水样品（mL） |
|
0.25 |
0.50 |
0.75 |
1.00 |
| 发光菌悬液（mL） |
|
0.01 |
0.01 |
0.01 |
0.01 |
| 混合液中海水浓度（%） |
|
0.05 |
0.10 |
0.15 |
0.20 |
请完善实验步骤：
①1号试管中应加入：3％NaCl溶液、海水样品、发光菌悬液分别为 mL。
②各试管静置15min后， 。
（2）计算相对抑光率：按照公式T％= 计算各组相对抑光率。
（3）如果测得上述各组相对抑光率如下：
| 组别 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
| 相对抑光率（%） |
0 |
6 |
13 |
17 |
23 |
①请绘制海水浓度对相对抑光率影响的曲线。
②根据结果可以判断待测海水样品 。
2010年10月11日，美国政府批准首例胚胎干细胞(ES细胞)人体临床试验。请回答下列与胚胎干细胞有关的问题：
（1）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞，培养过程如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。胚胎干细胞的结构特点是______________________。在培养动物细胞时，培养液中加抗生素的目的是________________________。
（2）早期胚胎发育在______________阶段以前的细胞是全能性细胞。胚胎干细胞在的培养液中，能够坚持不分化的状态。
“白菜—甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易储存等优点。如图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图，请完成下列问题：
（1）由杂种细胞D培育成白菜—甘蓝植株，采用的技术手段是________。该过程说明杂种细胞具有________。
（2）要制备“白菜—甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根、发芽能力的________结构，包裹上人工种皮等。
（3）在d过程培养中，培养基的成分通常包括水、______、有机营养和________等，同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证__________________。
（4）在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是______________，融合依据的原理是_______________________________________________。
（5）选取适宜浓度的蔗糖溶液，加入适量配制成细胞壁分解液。其中选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是：适宜浓度的蔗糖溶液___________________________。
苏云金芽孢杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。
（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。
（2）基因工程的核心步骤是____________________。
（3）图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。用BstⅠ与BamHⅠ酶切后的目的基因片段含有________个游离的磷酸基团。
（4）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的_____________________。
（5）重组质粒是否导入受体细胞，在分子水平上的经检测方法是。
（6）图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T－DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中________对T－DNA的降解。
（7）已知转基因植物中毒素蛋白只与某些昆虫肠上皮细胞表面的特异性受体结合，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞________________________。
（8）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的________基因频率的增长速率。
下图表示某雌性高等生物细胞分裂过程中某时期的染色体示意图。请回答：
（1）图中细胞正处于分裂期，细胞名称。该细胞含有对同源染色体。
（2）请绘出该细胞产生极体的同时产生的卵细胞示意图。
（3）在不考虑交叉互换时，此动物产生的卵的类型有______种，种类多样性的产生是由于在产生卵的过程中，发生了非同源染色体的________________。种类的多样性有利于在自然选择过程中的______。
用黄色圆粒豌豆（YYRR）和绿色皱粒豌豆（yyrr)作亲本，杂交得到F1,F1自交得到F2。某研究性学习小组的同学从F2中选取了一粒黄色圆粒豌豆甲，欲鉴定其基因型。请完善下列实验方案并回答问题：
（1）选取多株表现型为_____的豌豆乙与甲一起播种，进行杂交实验。实验时，应选用的母本、父本分别是______，原因是______________；在母本的花成熟前，应先采取_______处理，待花成熟时再进行_______。
（2）请预测该实验可能得到的实验结果并得出相应的结论：
| 预测结果（后代表现型） |
结论（甲的基因型） |
| ① |
YyRr |
| 黄色圆粒和黄色皱粒 |
② |
| ③ |
YyRR |
| ④ |
⑤ |