菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基凶转入菊花,培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答:
(注:卡那霉素抗性基因(KanR为标记基因,菊花叶片对卡那霉素高度敏感)
(l)质粒是基因工程中最常用的载体,其化学本质是 ,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为载体。
(2)下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是 ,连接它们所需要的基本工具是 。
(3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒,可用 处理;使其处于感受态。
(4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及 的固体培养基中,在适宜条件下进行培养,筛选转基因菊花。
(5)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时,需根据抗虫基因(目的基因)两端的部分碱基序列设计特异引物,若其中一种引物共用了31个,则目的基因最多扩增了 次。
(6)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫,实验结果如下表所示。
请据表回答( )
①对照组应饲喂等量的 。
②据表分析, 差异显著,说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
下面是某个高等动物体内细胞分裂的示意图,右面的曲线图表示该动物细胞中一条染色体上DNA的含量变化。分析回答:
(1)该动物体细胞内有染色体条。表示细胞有丝分裂的图是。
(2)B图表示时期,形成的子细胞含有同源染色体对。
(3)经有丝分裂产生的子细胞具有与亲代细胞相同数目、相同形态的染色体,其原因是染色体完成后平均分配到两个子细胞中,形成的子细胞的名称叫。
(4)在曲线图中,a~b段DNA含量发生变化的原因是。在A、B、C三图中,与b~c段相对应的细胞是图。
(5)若该动物体细胞内有两对等位基因Y、y和R、r,它们分别位于两对同源染色体上,则图C细胞分裂形成的子细胞的基因组成可能为。c~d段变化的原因是。
基因工程又叫做基因拼接技术。该技术能够通过对生物的基因进行改造和重新组合,产生出人类所需要的基因产物。自20世纪70年代基因工程发展起来以后,人们开始采用高新技术生产各种基因产品。下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1和图2示基因工程部分操作过程:
⑴从表中四种酶的切割位点看,可以切出平末端的酶是__________。
⑵将目的基因与质粒DNA缝合时,两条链上的磷酸、脱氧核糖在__________酶的作用下连接起来,形成磷酸二酯键;两条链间的碱基对通过__________连接起来。
⑶图2中的质粒分子可被表中__________酶切割,切割后的质粒含有_____个游离的磷酸基团。
⑷若对图中质粒进行改造,插入的Sma I酶切位点越多,质粒的热稳定性越_____。
⑸在相关酶的作用下,甲与乙能否拼接起来?并说明理由:________________________。
下图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:
(1)若A、B细胞为动物细胞,则一般取自成年动物的、幼龄动物的器官或组织,再用胰蛋白酶使其分散开来。从A、B细胞到C细胞的过程中,常用作为生物诱导剂来诱导融合。A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。
(2)若A、B细胞为植物细胞,那么这样的细胞已经用酶降解去掉,进而形成。A、B到C细胞的过程中,常用的化学方法是用来诱导融合。
(3)若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为B淋巴细胞,则促融后能形成种融合细胞(只考虑细胞两两融合),还应从中筛选出既能大量增殖又能产生的杂交瘤细胞。由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程中所用的技术手段是。
如图为获得抗虫棉的技术流程。在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。
请据图回答:
(1)A过程所用的载体是______________,需要的工具酶有____________和____________。
(2)C过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂和激素外,还需加入____________。
(3)由图中离体棉花叶片组织获得转基因抗虫植株可采用____________技术,该技术所依据的原理是_______________________________________________。
(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测,D过程应该用放射性同位素(或荧光分子)标记的__________作为探针。
(5)如果从个体生物水平来鉴定,D过程可用的最简单检测方法是____________。
在20世纪50年代,酶已经大规模地应用于各个生产领域,到了70年代又发明了固定化酶与固定化细胞的技术。
(1)在实际生产中,固定化酶技术的优点是________________________。
与固定化酶技术相比,固定化细胞固定的是________。
(2)制备固定化酵母细胞,常用的固定化材料是________,使用了下图中方法[ ]_ _______(填出号码与名称)
(3)制作固定化酵母细胞时,充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和________溶液中形成凝胶珠,在海藻酸钠熔化的过程中注意事项是,部分同学实验制得的凝胶珠不是圆形或椭圆形,其主要原因是____________。
(4)制备固定化酶不宜用包埋法的原因。