(12分)【生物——现代生物科技专题】
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:
(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的_________,此技术属于_________工程范畴。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时,为满足细胞代谢的需要,可在培养基中加入的天然成分是_______________。
(3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的______设计引物,利用__________技术扩增Rag2基因片段。用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有______________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的______________,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
某蛋白质分子由四条肽链组成,共657个氨基酸,请回答:
(1)写出天门冬氨酸和苯丙氨酸脱水缩合过程。
(2)该蛋白质分子中至少含有游离的氨基和游离的羧基分别是个。
(3)该蛋白质分子中,共有个肽键;在该蛋白质分子形成过程中,相对分子质量减少了。
(4)假设该蛋白质分子中的一条肽链为178肽,其分子式为CxHyOWNZS(z>178,w>179),
并且是由下列五种氨基酸组成的:
那么将该178肽彻底水解后将会得到个赖氨酸。(结果可含分子式中的未知数)
补充正常凝血因子F8可以治疗甲型血友病,因此可以利用转基因技术人工生产F8。某种大肠杆菌的质粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列,大肠杆菌的DNA分子中则含有β-半乳糖酶ω片段序列,由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列,可以使培养基中含有X-gal底物转变成蓝色产物,当缺少任意一个α或ω片段序列,X-gal底物不能转变成蓝色产物。HindⅢ、 EcoRI、BamHI分别为三种限制性内切酶,下图中箭头所指为三种限制酶的切点。
(1)应选用的限制性内切酶是,选择的依据是
(2)限制酶作用的化学键是。
(3)控制F8的基因也可以通过人体细胞相应的mRNA来合成,该合成的过程称为。将经转基因技术处理过的质粒导入大肠杆菌后,再将大肠杆菌接种到含有X-gal底物的培养基培养一段时间后,培养基中出现较多的蓝色菌落,这是因为。
一对表现型正常的夫妇,生了一个镰刀型细胞贫血症(常染色体隐性遗传病)患儿。在他们欲生育第二胎时,发现妻子的双侧输卵管完全堵塞,不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断,过程如图。
请回答:
(1)过程①是指在体外进行的处理,从而使精子与卵子结合形成受精卵;过程②称为。
(2)在对胎儿进行镰刀形细胞贫血症的产前基因诊断时,要先从羊水中的胎儿细胞提取物质③进行PCR扩增。然后用Ⅱ对扩增产物进行切割,产生多个片段的酶切产物。据此判断,
Ⅱ是一种酶。
(3)不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同,形成不同的电泳条带。该家庭成员的镰刀型细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④,据此判断胎儿为
(正常/患者/携带者)。
阅读下列材料,分析后简要回答问题:
(1)写出以下过程或结构的名称:
A;B;C;D。
(2)材料2中在获得杂种细胞的容器中还有其他什么细胞?。
(3)再分化(需要或者不需要)光照,与A过程相比,培养基的主要区别在于。
(4)名贵花卉进行离体培养时不应采用该株的
A.茎尖 | B.子房壁 | C.花粉粒 | D.叶片 |
泡菜是一种历史悠久的大众喜爱的发酵蔬菜制品,乳酸菌是泡菜生产中的主要生产菌种, 选取6种泡菜老液,筛选优良的乳酸菌菌种。筛选示意路线图如下:
(1)乳酸菌的培养条件除了适宜的温度、pH之外,还必须保证___________条件。
(2)初筛、复筛宜选择____(固体或液体)培养基,当复筛的培养基中出现即可接种到斜面保藏。增殖培养宜选择________(固体或液体)培养基。