2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出绿色荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。已知GFP基因最初从发光水母中提取出来。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠,下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程,请分析回答:
(1)用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、_______和_______。图中①过程需要的工具酶有________和______;过程②常用的方法是_______________;过程③利用的生物技术是________;在进行过程④前,利用________技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。
(2)水母的GFP基因之所以能“嫁接”到小鼠染色体的DNA上,其原因是___________________。
(3)GFP基因有时还可与其他目的基因一起构建到载体上,不影响目的基因的表达,且对细胞无毒害作用,因此GFP基因可以作为基因表达载体上的________。
(4)目前科学家们通过________工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等,该工程是直接改造GFP分子,还是改造GFP基因?________________。
瑞士科学家培育出的一种富含β胡萝卜素的水稻新品种——“黄金水稻”,可望结束发展中国家人口维生素A摄入量不足的状况(注:β胡萝卜素是形成维生素A的基础材料,维生素A缺乏是导致发展中国家千百万儿童失明和罹患其他疾病的常见原因之一)。如下图表示这一技术的基本过程,请据图回答以下问题:
(1)“剪切”所使用的酶是______________,“剪切”结果使DNA分子片段产生了________。携带“β胡萝卜素合成基因”进行转化的载体具有一个至多个___________,以供外源基因插入。
(2)在“黄金水稻”的培育中,能确定“β胡萝卜素合成基因”已成功在水稻体内表达的简便方法是____________。
下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图,请据图回答以下问题:
(1)技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)图中HAT培养基属于培养基,
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是。
(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外,还可以采用的生物诱导剂是。
下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图。Ⅲ是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。已知几种氨基酸的密码子:甲硫氨酸(AUG)、甘氨酸(GGA)、丝氨酸(UCU)、酪氨酸(UAC)、精氨酸(AGA)、丙氨酸(GCU),请根据下图结合你所学过的知识回答以下问题:
(1)①步骤为________,该过程是基因工程操作程序的核心,Ⅱ包括________、四环素抗性基因、启动子、终止子以及复制原点等。将Ⅱ导入双子叶植物棉花受体细胞最常用的方法是________。
(2)为在短时间内大量获得目的基因,可用_____扩增的方法,其原理是________。
(3)③过程的原理是________________________。理论上,在该转基因植物自交产生的F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的________。
(4)图中合成的多肽,其前三个氨基酸的序列是____________________。
(12分)如图所示为转基因牛的培育过程。
(1)①过程为______,所用的工具酶为______。
(2)体外培养胚胎干细胞时,通常要加入______等天然成分。为了防止培养过程中受到污染,应将培养细胞处于___的环境。细胞培养过程中所需的气体主要O2和CO2,其中CO2的主要作用是______。
(3)②过程是将细胞注入图中囊胚的___位置。母牛A和B需要用激素进行______处理。
(4)为获得较多基因型相同的犊牛,常采用______的方法,在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意_________。③过程是_________。
(10分)微生物培养和发酵工程等在传统生物技术的运用中具有非常重要的地位。
(1)在设计发酵装置时,排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,其原因是_________。
(2)为提高果酒的品质及节约成本.可采用固定化技术,微生物细胞的固定多采用___法。在加工制作罐头、果汁时,___酶可使浑浊的果汁变得澄清,从而提高果汁品质。
(3)微生物接种的方法很多,最常用的两种方法是_________,接种过程中,接种环和接种针等常用的灭菌方法是______。
(4)制备培养基的过程中,倒平板是一个非常重要的环节。将融化的培养基倒入培养皿中以后,等到培养基凝固后,需将平板倒过来放置,使培养皿盖在下、皿底在上,目的是_________。
(5)某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是______。