下表是兴趣小组通过配制不同浓度NaCl溶液，进行兔红细胞的形-优题课

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：
K₂HPO₄ NaCl H₂O葡萄糖尿素酚红琼脂
0.12g 0.12g 15mL 0.025g 2.0g 0.25mg 0.5g
（1）分解尿素的细菌都能合成脲酶，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？参与了氮循环（或维持氮平衡）．写出细菌分解尿素的方程式．
（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？不能（能/不能），原因是琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物．
（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择培养基进行培养．培养一段时间后，使用对微生物细胞进行计数．计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性 A

A．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数

B．如果方格内微生物细胞数量多于300 个，培养液先稀释后再计数

C．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞

D．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数

（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用固定化酶技术．

利用生物技术在食品加工或提取某种物质的实践中具有重要的意义．请回答下列相关问题：
（1）如图1所示为泡菜的制作及亚硝酸盐含量测定的流程图．制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是所含亚硝酸盐的含量低．发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，原因是发酵不同时期亚硝酸盐的含量发生变化．发酵过程中应及时测定亚硝酸盐的含量，及时检测以把握取食泡菜的最佳时机．测定亚硝酸盐含量的方法是比色法．
（2）如图2表示柠檬精油的提取过程，请据图回答问题：
①图中的A、B、C分别是石灰水、相当于柠檬果皮质量0.25%的小苏打和5%的硫酸纳、过滤．
②提取柠檬油不采取水蒸气蒸馏法的原因是：水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题．

某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究，操作如下：某年1月4日下午选取1、2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6kg，再分别倒入相同量的煮沸并冷却的10%的盐水，将坛密封，置于同一环境中．封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量，后来定时测定，结果如图．请问：

（1）实验中盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是：加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响在腌制过程中，会出现坛中溶液量增加，这是由外界溶液浓度过高使细胞渗透失水．
（2）在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封坛的作用是提供无氧环境；
（3）该小组对实验数据的处理方法是否合理？不合理．说明理由：应将三个坛中，每次测定的亚硝酸盐含量分别记录，求出平均值，然后以时间为横坐标，亚硝酸盐含量为纵坐标做曲线图．
（4）测定亚硝酸盐含量的方法是比色法，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量．
（5）实验中三只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异，最可能的原因是：各坛中微生物种类和数量可能存在差异．

生物技术的广泛应用，给社会带来了较大的经济效益，受到社会的广泛关注．请回答下列有关问题：
（1）制作泡菜需要测定亚硝酸盐的含量，方法是比色法，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量．
（2）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰油中，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是水蒸汽蒸馏法；玫瑰精油的提取需要大量原料，通常采用植物组织培养技术来实现玫瑰的快速繁殖．
（3）在制备固定化酵母细胞的过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温才能加入已活化的酵母菌，原因是防止高温杀死酵母菌．如果在CaCl₂溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明固定的酵母菌的数目较少．
（4）微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用选择培养基，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．

某实验小组在泡菜制作过程中每隔3至4天测一次亚硝酸盐的量，结果如下表，请回答下列问题：
（腌制过程中亚硝酸盐的含量变化mg/kg）

腌制天数	1号坛	2号坛	3号坛
封坛前	5	5	5
3	15	10	7
6	25	12	13
9	30	15	17
13	18	9	11
17	7	4	5

（1）该实验小组是用目测对比法（比色法）的方法大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量，配制提取泡菜中亚硝酸盐的提取剂的方法是：50g氯化钡和50g氯化镉溶解于100mL蒸馏水中，用盐酸调节pH值至 1 ．
（2）关于亚硝酸盐含量测定的原理描述正确的是 C ．
A、重氮化→酸化→显色→比色 B、重氮化→酸化→比色→显色
C、酸化→重氮化→显色→比色 D、酸化→重氮化→比色→显色
（3）进行比色时，加完试剂后要静止15分钟后才能观察样品的颜色并比较，静止15分钟的原因是反应时间过短，显色不充分，会影响比色的准确性，最终影响实验结果．（充分显色，确保比色的准确性，避免影响实验结果．）．
（4）发酵过程中，1、2、3号坛亚硝酸盐的含量都有一个上升和下降的过程，上升的原因是开始坛内条件有利于某些杂菌（硝酸还原菌）的生存繁殖，使硝酸盐还原成亚硝酸盐．．
（5）1、2、3号坛封坛前亚硝酸盐的含量都是5mg/kg，但发酵过程中上升幅度有差异，造成这种差异的最主要的原因可能是杂菌污染程度与用盐量的不同．

组别	细胞形态	分析原因
1	胀破	在蒸馏水中细胞液浓度 ▲① 外界浓度细胞吸水胀破
2	正常	细胞液浓度▲②外界浓度，细胞水分子运动达到平衡
3	皱缩后恢复	细胞液浓度小于外界浓度，细胞失水皱缩，但是离子会进入细胞，一段时间后细胞内外浓度相等，细胞恢复形态。
4	皱缩后不恢复	细胞液浓度小于外界浓度，▲③